[发明专利]一种同步检测4种辣椒病毒的多重PCR方法

摘要

本发明属于农作物病害诊断和分子生物学技术领域，公开了一种同步检测4种辣椒病毒的多重PCR方法，该PCR体系中含有4对特异性引物(SEQ ID NO1～8)，在一个PCR体系中同步对4种病毒进行扩增，得到了1406bp,1202bp,600bp和376bp的特异性条带，建立并优化了能同步检测BBWV2、PVY、ChiVMV和CMV的多重RT‑PCR反应体系。检测结果表明优化后的多重RT‑PCR反应体系能对田间样品进行快速、高效地、准确的检测。对监测辣椒上PVY等4种常见病毒病在田间的发生情况以及病害流行预测具有十分重要的意义。

主权项

一种同步检测BBWV2、PVY、ChiVMV和CMV四种辣椒病毒的多重RT‑PCR方法，在同一PCR体系中，包含有如下特异性引物：扩增BBWV2的特异性引物的核苷酸序列为：SEQ ID NO.1：5′‑GCGTCCTGAGTTTGTTGTAGCG‑3′，SEQ ID NO.2：5′‑CCTCCATCAAGCCTTGACCATATC‑3′；扩增PVY的特异性引物的核苷酸序列为：SEQ ID NO.3：5′‑CGGTTCGTTTGAATGCAAGC‑3′，SEQ ID NO.4：5′‑CTTGCTGCTTCTCCCCTATGG‑3′；扩增ChiVMV的特异性引物的核苷酸序列为：SEQ ID NO.5：5′‐TGGCTGTGCAAGTTACCTTC‐3′，SEQ ID NO.6：5′‐ACCTGTGTGATGACGTGGGT‐3′；扩增CMV的特异性引物的核苷酸序列为：SEQ ID NO.7：5′‑AAANCTTGTTTCGCGCATTCA‑3′；SEQ ID NO.8：5′‑GAGGGAGGGTTCTGGGAACA‑3′。