[发明专利]一种高效重组表达限制性内切酶的方法在审
| 申请号： | 201710035737.0 | 申请日： | 2017-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN107058260A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 高嵩;张坤晓;许恒皓;李肖;胡艳红;张颖;吴胜月 | 申请（专利权）人： | 淮海工学院 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/70 |
| 代理公司： | 连云港润知专利代理事务所32255 | 代理人： | 刘喜莲 |
| 地址： | 222000 江苏省连云港市海州区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种高效重组表达限制性内切酶的方法，包括如下步骤（1）先将限制性内切酶基因插入，再将载体转化导入大肠杆菌，筛选培养、测序，获得限制性内切酶的重组表达质粒，质粒载体为利用乳糖操纵子和T7启动子调控，IPTG诱导的pET系列表达载体；（2）将限制性内切酶的重组表达质粒转化至BL21（DE3）pLysS感受态细胞中，筛选获得限制性内切酶的重组表达菌株；（3）扩大培养限制性内切酶的重组表达菌株并诱导表达限制性内切酶。本发明方法利用葡萄糖对乳糖操纵子表达系统本底表达的抑制作用，以及BL21（DE3）pLysS菌株自身对乳糖操纵子表达系统本底表达的严苛控制作用，省略了对宿主DNA的甲基化保护步骤，不仅大大简化了重组表达过程，可以应用于多种限制酶的重组表达。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 重组 表达 限制性 内切酶 方法 | ||
【主权项】：
一种高效重组表达限制性内切酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）先将限制性内切酶基因插入，再将载体转化导入大肠杆菌，筛选培养、测序，获得限制性内切酶的重组表达质粒；所述质粒载体为利用乳糖操纵子和T7启动子调控，IPTG诱导的pET系列表达载体；（2）将限制性内切酶的重组表达质粒转化至BL21（DE3）pLysS感受态细胞中，筛选获得限制性内切酶的重组表达菌株；（3）扩大培养限制性内切酶的重组表达菌株并诱导表达限制性内切酶。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于淮海工学院，未经淮海工学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201710035737.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：可调中心式抛丸机
- 下一篇：一种双枪滚筒式自动喷砂机
