[发明专利]一种对超薄细胞的高精度轴向定位与成像方法与装置

摘要

本发明公开了一种对超薄细胞的高精度轴向定位与成像方法，通过将细胞的上下表面分为两个部分，分别对这两个部分进行不同方式的多角度照明得到与轴向位置相对应的荧光光强信息，再结合相应算法得到细胞内荧光颗粒的轴向信息，获取三维图像。本发明还公开了一种对超薄细胞的高精度轴向定位与成像装置，照明光通过1/4波片和二维扫描振镜系统在样品表面进行环状扫描同时改变入射角度，产生两种不同的照明方式，激发出荧光被CCD接收；结合收到的荧光强度与样品轴向位置之间的关系就可以实现对超薄细胞的高精度轴向定位。本发明装置简单，操作方便；利用激发光的不同入射角度对整个细胞的上部分和下部分都进行了高精度的定位和成像。

主权项

1.一种对超薄细胞的高精度轴向定位与成像方法，其特征在于：针对细胞的下表面，由入射角大于全内反射临界角的光产生的倏逝波进行照明；激发的倏逝波场沿着z轴发生指数衰减，对细胞的下表面照明激发荧光，通过改变照明角度改变衰减系数，实现z轴的差别照明，通过求解逆问题的方式，从多角度图像中重建出细胞下表面的三维荧光密度分布；针对细胞的上表面，由入射角度小于全内反射临界角透射光和其被细胞上表面附近反射一次后的反射光干涉产生的图案进行照明；改变角度同样得到不同深度的荧光颗粒对应不同入射角度时被激发的荧光强度，通过求解逆问题的方式，得到细胞上表面的三维荧光密度分布；根据采集到上表面和下表面产生的荧光光强信息，进行细胞的轴向定位与三维成像。