[发明专利]一种草酸脱羧酶的制备方法及应用有效
| 申请号： | 201710015055.3 | 申请日： | 2017-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN106939315B | 公开（公告）日： | 2020-09-18 |
| 发明（设计）人： | 汪小锋;汪卫;吴玉峰;宋保平 | 申请（专利权）人： | 武汉康复得生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/60 | 分类号： | C12N15/60;C12N15/75;C12N9/88 |
| 代理公司： | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人： | 程殿军;张瑾 |
| 地址： | 430050 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种草酸脱羧酶的制备方法，首先构建包含芽孢杆菌属的酸诱导启动子和分泌信号肽以及在其调控下配置的真菌来源的草酸脱羧酶基因的重组表达质粒载体，用该载体转化可以在pH≤4.5下正常生长的的芽孢杆菌，制备草酸脱羧酶重组菌。将该重组菌在发酵培养基中培养补加酸后进行诱导，通过简单纯化回收产生的胞外草酸脱羧酶。本发明方法制备的胞外草酸脱羧酶用于诊断试剂原料，药物组合物、保健食品或特殊医学用途配方食品的原料。采用突变的酸诱导启动子替换重组表达载体中的原始酸诱导启动子，转化芽孢杆菌能获得更高的表达量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 草酸 脱羧酶 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种高效生产真菌来源的重组草酸脱羧酶表达载体，其特征在于，包括含有酸诱导启动子、分泌信号肽、去原始信号肽的草酸脱羧酶基因和trpA终止子的表达质粒，其中，所述酸诱导启动子是在指pH值为1.5～4.5的条件下，能在芽胞杆菌中启动基因表达的启动子，所述分泌信号肽是指在芽胞杆菌中能促进真菌来源的草酸脱羧酶基因分泌表达信号肽序列。
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