[发明专利]一种检测饲料中多种脂溶性维生素的方法

摘要

本发明公开了一种检测饲料中多种脂溶性维生素的方法，包括以下步骤：（1）根据检测需要，制备多种维生素标准溶液，包括以下维生素中的至少两种以上：维生素A醋酸酯、维生素D₃、维生素E乙酸酯；采用HPLC‑MS/MS检测标准溶液，得到标准曲线方程；（2）称取样品，到棕色容量瓶中，加入提取溶液超声提取10‑30min，冷却定容，离心，用0.22μm有机相滤膜，过滤上机，采用与步骤1相同的色谱参数和质谱检测参数进行分析测试；（3）根据步骤1和步骤2的检测结果计算得出样品中的多种维生素的含量。本发明的同时检测配合饲料中的多种脂溶性维生素的方法，在一次检测分析过程中完成多种不同的维生素的检测分析。

主权项

1.一种检测饲料中多种脂溶性维生素的方法，包括以下步骤：（1）制备多种维生素标准溶液，包括以下维生素中的至少两种以上：维生素A醋酸酯、维生素D₃、维生素E乙酸酯；采用HPLC‑MS/MS检测标准溶液，得到标准曲线方程；色谱条件如下：色谱柱：C18柱；所述C18柱是：ADME pH 2‑10 3μm 2.1 mm I.D.×150mm柱；流动相包括流动相A：甲醇水溶液相，和流动相B：甲酸水溶液相；其中流动相A：甲醇水溶液中甲醇的体积比例大于95%，流动相B：甲酸水溶液中甲酸的含量低于1wt%；采用梯度洗脱，梯度条件：0~2min，流动相A 50~100%；2~9min，流动相A 100%；9~9.5min，流动相A 100~50%；质谱条件为，ESI正离子扫描模式：多反应监测参数：干燥气温度325℃，干燥气流速11L/min，雾化气压力45psi，鞘气温度300℃，流速9L/min，毛细管电压4000V，喷嘴电压500V；（2）称取样品，到棕色容量瓶中，加入提取溶液超声提取10‑30min，冷却定容，离心，用0.22μm有机相滤膜，过滤上机，采用与步骤（1）相同的色谱参数和质谱检测参数进行分析测试；所述提取溶液是，由提取溶液第一组分和提取溶液第二组分按照25‑35：65‑75体积比例混合配制而成的溶液；所述提取溶液第一组分是0.03‑0.07% 氨水溶液；所述提取溶液第二组分是0.1‑0.3% BHT甲醇溶液；（3）根据步骤（ 1） 和步骤（ 2） 的检测结果计算得出样品中的多种维生素的含量。