[发明专利]一种重组菌催化莱鲍迪甙A制备莱鲍迪甙M2的方法有效
| 申请号： | 201611142851.5 | 申请日： | 2016-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN106834389B | 公开（公告）日： | 2020-03-17 |
| 发明（设计）人： | 李艳;陈可泉;周芳芳;郝宁;欧阳平凯 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12P19/56 | 分类号： | C12P19/56;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京汇恒知识产权代理事务所(普通合伙) 32282 | 代理人： | 王月霞 |
| 地址： | 211816 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一株重组菌及其在催化莱鲍迪甙A生成莱鲍迪甙M2中的应用，所述重组菌中同时含有番茄来源糖基转移酶UGTSL2基因和马铃薯来源蔗糖合酶StSUS1基因，将番茄来源糖基转移酶UGTSL2基因克隆到pRSFDuet‑1的NdeI与XhoI位点之间，构建得到重组质粒pRSFDuet‑SL2，然后再将马铃薯来源蔗糖合酶StSUS1基因克隆到pRSFDuet‑SL2的NcoI和EcoRI位点之间，构建得到重组质粒pRSFDuet‑SL2‑SUS1，将重组质粒pRSFDuet‑SL2‑SUS1转化到宿主细胞中，得到重组菌。将重组菌诱导表达后取粗酶液，加入到反应混合物中催化莱鲍迪甙A生成莱鲍迪甙M2，反应中使用重组菌破碎后的粗酶液，避免了酶的分离纯化，也无需制作冻干粉，反应液中不需添加直接底物莱鲍迪甙D及UDP或UDP‑葡萄糖和任何细胞通透剂或其他化学试剂，环境友好性更佳。莱鲍迪甙M2的产率高达11.09g/L。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 催化 莱鲍迪甙 制备 m2 方法 | ||
【主权项】：
一种重组菌催化莱鲍迪甙A制备莱鲍迪甙M2的方法，其特征在于，将重组菌诱导表达后取粗酶液，加入到反应混合物中催化莱鲍迪甙A生成莱鲍迪甙M2，所述反应混合物中包括莱鲍迪甙A、蔗糖和磷酸钠缓冲液；所述重组菌中同时含有番茄来源糖基转移酶UGTSL2基因和马铃薯来源蔗糖合酶StSUS1基因。
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