[发明专利]一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法

摘要

本发明公开了一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法。本发明方法采用2,4‑二硝基苯肼为衍生剂，乙腈和水为流动相，运用高效液相色谱二极管阵列检测器进行测定分析，通过一次进样，双通道波长同时检测食用植物油中三种毒性醛类丙二醛、4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛。本发明方法三种毒性醛类的检测限分别为0.012μg/g、0.020μg/g和0.014μg/g。本发明方法简化操作过程，降低成本，符合定性、定量的要求，检测精密度和重复稳定性高，更适合高校研究人员、工业化应用。

主权项

1.一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法，其特征在于，一次进样，双波长同时检测食用植物油中三种毒性醛类丙二醛、4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛；所述双波长分别是波长为310nm和378nm；所述丙二醛、4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛的检测限分别为0.012 μg/g、0.020 μg/g和0.014 μg/g；所述丙二醛、4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛的加标回收率分别为98.13‑102.94%、97.73‑101.73%和97.66‑102.83%；所述丙二醛、4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛的检测线性 范围分别为0.02‑10.0μg/g、0.02‑4.00μg/g和0.03‑4.00μg/g；具体包括如下检测步骤：（1）衍生剂的配制：配制0.05 mol/L 2,4‑二硝基苯肼的酸性乙醇溶液，内含为10‑15v/v%的浓盐酸；（2）标准溶液的配制：准确称取1,1,3,3‑四乙氧基丙烷，定容后稀释为10 μg/mL MDA标准品溶液，再依次配制MDA标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10μg/mL；分别取4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛的标准品溶液，依次配制4‑HNE标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，4‑HHE标准溶液浓度为0.03、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，备用；（3）样品衍生溶液的制备：取油样，加入30 v/v %‑70 v/v %乙醇的水溶液，得到浓度为0.1~1.0 g/mL的样品溶液，涡旋震荡3‑10 min，3000‑5000×g离心5‑10 min后收集下层清液，再对油层重复上述步骤各一次，合并两次收集的下层清液；加入体积比为0.1~1.0配制的衍生剂，涡旋1‑5 min充分混匀，40‑80℃避光水浴加热1.5‑3.5h，冰浴快速冷却，加入二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡1‑5min，3000‑5000×g离心5‑10 min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入甲醇或乙腈或初始流动相复溶，得到样品衍生溶液；丙二醛、4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛的标准溶液以及样品同步衍生化，过0.45μm或0.22μm滤膜，上机进样分析；（4）色谱条件色谱柱：C18色谱柱4.6×250mm，内径5μm；检测器：二极管阵列检测器；检测波长：双通道检测，通道一：310nm，通道二：378nm；流动相：乙腈和水梯度洗脱v/v，洗脱条件为：0‑18 min，乙腈：水=45:55；18‑23 min，乙腈：水=（45→70）：（55→30）；23‑30 min，乙腈：水=70:30；流速：0.6‑1.2 mL/min；柱温：25‑35 ℃；进样量：10‑40 μL；（5）将样品溶液的保留时间与标准溶液的保留时间进行对比，获得峰面积代入标准曲线，实现对丙二醛、4‑羟基己烯醛和4‑羟基壬烯醛的定量。