[发明专利]一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法

权利要求书

1.一种同时测定食用植物油中三种毒性醛类的双波长检测方法，其特征在于，一次进样，双波长同时检测食用植物油中三种毒性醛类丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛；所述双波长分别是波长为310nm和378nm；所述丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的检测限分别为0.012 μg/g、0.020 μg/g和0.014 μg/g；所述丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的加标回收率分别为98.13-102.94%、97.73-101.73%和97.66-102.83%；所述丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的检测线性 范围分别为0.02-10.0μg/g、0.02-4.00μg/g和0.03-4.00μg/g；具体包括如下检测步骤：

（1）衍生剂的配制：配制0.05 mol/L 2,4-二硝基苯肼的酸性乙醇溶液，内含为10-15v/v%的浓盐酸；

（2）标准溶液的配制：准确称取1,1,3,3-四乙氧基丙烷，定容后稀释为10 μg/mL MDA标准品溶液，再依次配制MDA标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、5、10μg/mL；分别取4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的标准品溶液，依次配制4-HNE标准溶液浓度为0.02、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，4-HHE标准溶液浓度为0.03、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4μg/mL，备用；

（3）样品衍生溶液的制备：取油样，加入30 v/v %-70 v/v %乙醇的水溶液，得到浓度为0.1~1.0 g/mL的样品溶液，涡旋震荡3-10 min，3000-5000×g离心5-10 min后收集下层清液，再对油层重复上述步骤各一次，合并两次收集的下层清液；加入体积比为0.1~1.0配制的衍生剂，涡旋1-5 min充分混匀，40-80℃避光水浴加热1.5-3.5h，冰浴快速冷却，加入二氯甲烷溶液溶解，涡旋震荡1-5min，3000-5000×g离心5-10 min，收集下层溶液，氮吹浓缩，最后加入甲醇或乙腈或初始流动相复溶，得到样品衍生溶液；

丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的标准溶液以及样品同步衍生化，过0.45μm或0.22μm滤膜，上机进样分析；

（4）色谱条件

色谱柱：C18色谱柱4.6×250mm，内径5μm；

检测器：二极管阵列检测器；

检测波长：双通道检测，通道一：310nm，通道二：378nm；

流动相：乙腈和水梯度洗脱v/v，洗脱条件为：

0-18 min，乙腈：水=45:55；

18-23 min，乙腈：水=（45→70）：（55→30）；

23-30 min，乙腈：水=70:30；

流速：0.6-1.2 mL/min；

柱温：25-35 ℃；

进样量：10-40 μL；

（5）将样品溶液的保留时间与标准溶液的保留时间进行对比，获得峰面积代入标准曲线，实现对丙二醛、4-羟基己烯醛和4-羟基壬烯醛的定量。