[发明专利]一种马来酸顺反异构酶的热稳定性改造及其应用有效
申请号: | 201611108889.0 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN106636052B | 公开(公告)日: | 2019-06-21 |
发明(设计)人: | 周哲敏;余龙;周丽;崔文璟;刘中美;郭军玲;张斌 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/90 | 分类号: | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/46;C12P13/20;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 彭素琴 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种马来酸顺反异构酶的热稳定性改造及其应用,属于酶工程领域。本发明将来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶基因maiA通过半理性设计的方法进行了热稳定改造,得到的突变体与野生型的马来酸顺反异构酶相比,突变体G27A‑G171A在55℃的半衰期是野生型的2.9倍,酶活是野生型的1.96倍;突变体G27A‑K104R在55℃的半衰期是野生型的4.18倍,酶活是野生型的1.59倍。 | ||
搜索关键词: | 野生型 顺反异构 马来酸 突变体 热稳定性 半衰期 酶活 粘质沙雷氏菌 改造 理性设计 酶工程 酶基因 热稳定 应用 | ||
【主权项】:
1.一种马来酸顺反异构酶突变体,其特征在于,是将如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中的第27位甘氨酸突变为丙氨酸并将第171位甘氨酸突变为丙氨酸;或者将第27位甘氨酸突变为丙氨酸并将第104位赖氨酸突变为精氨酸;或者第27位甘氨酸突变为丙氨酸;或者第104位赖氨酸突变为精氨酸;或者将第171位甘氨酸突变为丙氨酸。
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