[发明专利]一种马来酸顺反异构酶的热稳定性改造及其应用有效
| 申请号： | 201611108889.0 | 申请日： | 2016-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN106636052B | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;余龙;周丽;崔文璟;刘中美;郭军玲;张斌 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/90 | 分类号： | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/46;C12P13/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 野生型 顺反异构 马来酸 突变体 热稳定性 半衰期 酶活 粘质沙雷氏菌 改造 理性设计 酶工程 酶基因 热稳定 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种马来酸顺反异构酶突变体，其特征在于，是将如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中的第27位甘氨酸突变为丙氨酸并将第171位甘氨酸突变为丙氨酸；或者将第27位甘氨酸突变为丙氨酸并将第104位赖氨酸突变为精氨酸；或者第27位甘氨酸突变为丙氨酸；或者第104位赖氨酸突变为精氨酸；或者将第171位甘氨酸突变为丙氨酸。
2.编码权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述的基因的载体或细胞。
4.一种表达权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体的重组菌，其特征在于，将编码突变体的基因与表达载体连接后，转化宿主大肠杆菌。
5.根据权利要求4所述的一种表达权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体的重组菌，其特征在于，表达载体为pET-24a(+)、pET-28a、pRSFDuet-1或pETDuet-1。
6.根据权利要求4所述的一种表达权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体的重组菌，其特征在于，所述大肠杆菌是大肠杆菌BL21(DE3)。
7.权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体在生产富马酸中的应用。
8.权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体在生产天冬氨酸中的应用。
9.权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体在生产苹果酸中的应用。
10.权利要求4或5所述的表达马来酸顺反异构酶突变体的重组菌在生产富马酸、天冬氨酸或苹果酸中的应用。
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