[发明专利]基于二甲基化多重标记及特征碎片离子的绝对定量方法有效
| 申请号： | 201611044507.2 | 申请日： | 2016-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN108088945B | 公开（公告）日： | 2020-11-17 |
| 发明（设计）人： | 张丽华;刘健慧;周愿;单亦初;杨开广;张玉奎 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | G01N30/88 | 分类号： | G01N30/88 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种多样品多靶标的高通量精确蛋白质组绝对定量方法。它是利用二甲基化反应标记肽段的N末端和赖氨酸氨基，通过二甲基化标记试剂各种同位素形式有机组合实现待测蛋白和/或肽段样品及已知量目标内标物中的蛋白和/或肽段的多重标记。标记后的样品使用液质联用系统进行分析，提取样品和内标物的二级谱中特征碎片离子峰面积进行定量，得到待测样品目标蛋白的绝对量。该方法分析通量高、大大节约分析时间、标记试剂廉价，实际应用性强、定量准确度高，精密度好，动态范围宽，满足基于内标物的多样品分析或基于标准曲线的多靶标分析的需求。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 甲基化 多重 标记 特征 碎片 离子 绝对 定量 方法 | ||
【主权项】：
1.基于二甲基化多重标记及特征碎片离子的绝对定量方法，其特征在于：对1份以上的待测蛋白和/或肽段样品及已知量目标内标物中的蛋白和/或肽段分别采用不同的二甲基化试剂进行分别标记，即可得到物理化学性质相同而相对分子量不同的一组同位素标记的蛋白和/或肽段，再将所得的蛋白和/或肽段混合进行质谱检测；利用液质联用系统进行质谱数据采集，提取样品和内标物的二级谱中相应的特征碎片离子峰强度进行比较，由内标物中已知量目标蛋白和/或肽段的绝对量得到样品中目标蛋白和/或肽段的绝对定量，进而实现多样品多靶标的高通量目标蛋白或肽段的绝对定量。
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