[发明专利]一种利用毕赤酵母高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法有效
| 申请号： | 201610308645.0 | 申请日： | 2016-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN105754885B | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 吴志猛;赵鑫锐;洪皓飞;邓涛 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N9/52;C12R1/84 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用毕赤酵母高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了Sortase A在毕赤酵母中的高效分泌表达，解决了目前已有报道中该酶在大肠杆菌胞内表达中存在的产率较低、菌体需要破壁和菌株不稳定的问题。经过表达策略的筛选和发酵条件优化，胞外Sortase A的酶活和浓度分别可达131.9U/mL和97.8mg/L。本发明通过实现Sortase A的高效分泌表达，为该酶的工业化生产及其在蛋白质工程领域的应用打下了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 酵母 高效 分泌 表达 肽酶 sortase 方法 | ||
【主权项】：
1.一种分泌表达转肽酶SortaseA的基因工程菌，其特征在于，选择AOX1或GAP启动子，以毕赤酵母SMD1168为表达宿主，以pPIC9k为表达载体，构建得到分泌表达SortaseA的基因工程菌。/n
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