[发明专利]一种异种脱细胞真皮基质的制备方法

摘要

本发明公开了一种异种脱细胞真皮基质的制备方法，具体包括以下几个步骤：取皮、脱表皮层、脱细胞处理、激光打孔、灭菌。本发明提供的异种脱细胞真皮基质的制备方法，对于细胞成分去除干净，抗原性低，保留了真皮胶原结构，组织相容性良好，且整个制备过程时间仅60h左右，处理时间短，处理成本低，具有良好的社会效益和经济效益。

主权项

一种异种脱细胞真皮基质的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1)取皮：选用巴马香猪皮为皮源，对取皮区进行脱毛、消毒，用取皮刀切取带有表皮层和真皮层的断层皮片，裁成所需尺寸，用1‰的苯扎氯铵溶液浸泡20～40min，去脂杀菌；2)脱表皮层：将步骤1)得到的断层皮片用0.25％胰蛋白酶溶液于4℃恒温条件下浸泡，剥离表皮层，剩余部分为真皮基质，用无菌PBS溶液洗涤3～5次；3)脱细胞处理：将步骤2)得到的真皮基质放入0.5％的Triton X‑100溶液中，室温下超声3～7min后再摇床震荡5～6h，再次超声3～7min后摇床震荡3～4h，取出真皮基质，放入无菌PBS溶液中摇床震荡1～2h，重复Triton X‑100溶液超声震荡‑超声震荡‑无菌PBS溶液震荡以上步骤1次，取出真皮基质，再用4％脱氧胆酸钠溶液超声清洗3～7min，摇床振荡2～3h，再用无菌PBS溶液中摇床震荡2～3h，破碎真皮中的细胞成分，并洗脱，得到脱细胞真皮基质；4)激光打孔：用激光在步骤3)得到的脱细胞真皮基质上间断打孔，用无菌PBS溶液洗涤3～5次；5)灭菌：将步骤4)的洗涤后的脱细胞真皮基质封装，经Co‑60γ射线辐照消毒灭菌，即得成品。