[发明专利]一种异种脱细胞真皮基质的制备方法

权利要求书

1.一种异种脱细胞真皮基质的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

1)取皮：选用巴马香猪皮为皮源，对取皮区进行脱毛、消毒，用取皮刀切取带有表皮层和真皮层的断层皮片，裁成所需尺寸，用1‰的苯扎氯铵溶液浸泡20～40min，去脂杀菌；

2)脱表皮层：将步骤1)得到的断层皮片用0.25％胰蛋白酶溶液于4℃恒温条件下浸泡，浸泡时间为22～24h，剥离表皮层，剩余部分为真皮基质，用无菌PBS溶液洗涤3～5次；

3)脱细胞处理：将步骤2)得到的真皮基质放入0.5％的TritonX-100溶液中，室温下超声3～7min后再摇床震荡5～6h，再次超声3～7min后摇床震荡3～4h，取出真皮基质，放入无菌PBS溶液中摇床震荡1～2h，重复TritonX-100溶液超声震荡-超声震荡-无菌PBS溶液震荡以上步骤1次，取出真皮基质，再用4％脱氧胆酸钠溶液超声清洗3～7min，摇床振荡2～3h，再用无菌PBS溶液中摇床震荡2～3h，破碎真皮中的细胞成分，并洗脱，得到脱细胞真皮基质；

4)激光打孔：用激光在步骤3)得到的脱细胞真皮基质上间断打孔，用无菌PBS溶液洗涤3～5次；

5)灭菌：将步骤4)的洗涤后的脱细胞真皮基质封装，经Co-60γ射线辐照消毒灭菌，即得成品，其中辐照时间为10～12h；

所述无菌PBS溶液是由NaCl 8.00g+KCl 0.20g+KH₂PO₄ 0.20g+Na₂HPO₄ 1.56g溶解于1000mL的容量瓶中并定容得到的。

2.如权利要求1所述的异种脱细胞真皮基质的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中切取的断层皮片的厚度为0.3～0.5mm。

3.如权利要求1所述的异种脱细胞真皮基质的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中孔径为0.1～1.3mm，孔间距为0.5～5mm。