[发明专利]梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的方法

摘要

本发明涉及一种梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的方法，以梨汁加工过程中产生的新鲜梨渣为主要原料，添加小麦麸皮、豆粕粉、硝酸钠、MnSO4和KH2PO4制成固态发酵培养基。将配制好的培养基进行高温灭菌，冷却后，接种多粘类芽孢杆菌KD101进行固态发酵。发酵结束后，将固态发酵醪进行热风干燥、粉碎，即获得多粘类芽孢杆菌微生物菌剂，其芽孢数达到160～180亿个/g，芽孢率达到97％～99％。本发明不仅可实现梨渣的资源化利用，而且可大大降低多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的生产成本。

主权项

一种梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的方法，其特征是包括以下步骤：a、种子培养基的配制及灭菌：于1L水中，加入20～30g葡萄糖、10～20g蛋白胨、5～10g酵母粉、4.0～4.5g磷酸二氢钾、1.6～2.3g碳酸钙CaCO₃，按照所述配比，将各种成分称重后加入三角瓶中，室温下搅拌均匀，制得种子培养基；用8层纱布密封后放入高压灭菌锅中，115℃～121℃灭菌15～20min，灭菌后把三角瓶冷却至室温；b、种子液的制备：挑取斜面保藏的多粘类芽孢杆菌KD101菌种2～3环，接种到步骤a中所述的种子培养基中，30℃、180～200rpm摇床振荡培养12～14h；c、固态发酵培养基的配制及灭菌：于1000g新鲜梨渣中，加入360～400g小麦麸皮、20～25g豆粕粉、10～15g硝酸钠、8～12g硫酸锰、10～15g磷酸二氢钾，按照所述配比，将各种成分称重后加入带有机械搅拌桨的卧式固态发酵罐中，室温下搅拌均匀制得固态发酵培养基；然后向发酵罐通入蒸汽开始灭菌，待罐温上升到115℃，保温15～20min，灭菌结束后，引入冷却水将发酵培养基温度降至25℃～30℃；d、固态发酵：将步骤b所述多粘类芽孢杆菌KD101种子液以8％～10％接种量接种到步骤c所述发酵罐中的培养基之中，控制发酵温度34℃，每12h搅拌一次，每次搅拌8～10min，发酵120～130h，得固态发酵醪。e、干燥：采用60℃～70℃热风将步骤d所述的固态发酵醪干燥含水量30％以下。f、粉碎：使用锤式粉碎机将步骤e所述的干燥后的固态发酵醪粉碎成60～70目的粉末，即获得多粘类芽孢杆菌微生物菌剂，菌剂包装后，存放在阴凉干燥处。