[发明专利]梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的方法

权利要求书

1.一种梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的方法，其特征是包 括以下步骤：

a、种子培养基的配制及灭菌：于1L水中，加入20～30g葡萄糖、10～20g 蛋白胨、5～10g酵母粉、4.0～4.5g磷酸二氢钾、1.6～2.3g碳酸钙CaCO₃，按 照所述配比，将各种成分称重后加入三角瓶中，室温下搅拌均匀，制得种子培 养基；用8层纱布密封后放入高压灭菌锅中，115℃～121℃灭菌15～20min， 灭菌后把三角瓶冷却至室温；

b、种子液的制备：挑取斜面保藏的多粘类芽孢杆菌KD101菌种2～3环， 接种到步骤a中所述的种子培养基中，30℃、180～200rpm摇床振荡培养12～ 14h；

c、固态发酵培养基的配制及灭菌：于1000g新鲜梨渣中，加入360～400g 小麦麸皮、20～25g豆粕粉、10～15g硝酸钠、8～12g硫酸锰、10～15g磷酸二 氢钾，按照所述配比，将各种成分称重后加入带有机械搅拌桨的卧式固态发酵 罐中，室温下搅拌均匀制得固态发酵培养基；然后向发酵罐通入蒸汽开始灭菌， 待罐温上升到115℃，保温15～20min，灭菌结束后，引入冷却水将发酵培养 基温度降至25℃～30℃；

d、固态发酵：将步骤b所述多粘类芽孢杆菌KD101种子液以8％～10％接种 量接种到步骤c所述发酵罐中的培养基之中，控制发酵温度34℃，每12h搅拌 一次，每次搅拌8～10min，发酵120～130h，得固态发酵醪。

e、干燥：采用60℃～70℃热风将步骤d所述的固态发酵醪干燥含水量30％ 以下。

f、粉碎：使用锤式粉碎机将步骤e所述的干燥后的固态发酵醪粉碎成60～ 70目的粉末，即获得多粘类芽孢杆菌微生物菌剂，菌剂包装后，存放在阴凉干 燥处。

2.根据权利要求1所述的梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的 方法，其特征是：所述步骤c中所使用的梨渣为梨汁加工时产生的新鲜梨渣。

3.根据权利要求1所述的梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的 方法，其特征是：所述步骤c中固态发酵培养基的组成为:于1000g新鲜梨渣 中，加入400g小麦麸皮、20g豆粕粉、15g硝酸钠、8g硫酸锰、15g磷酸二氢 钾。

4.根据权利要求1所述的梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的 方法，其特征是：所述步骤d中发酵温度为34℃，每12h搅拌一次，每次搅拌 8～10min，发酵120～125h。

5.根据权利要求1所述的梨渣固态发酵生产多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的 方法，其特征是，所述步骤f中所获得的多粘类芽孢杆菌微生物菌剂的芽孢数 达到160～180亿个/g，芽孢率达到97％～99％。