[发明专利]大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法

摘要

本发明公开了大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，该方法包括以下步骤(1)无菌材料的获得；(2)愈伤诱导；(3)芽分化；(4)复壮培养；(5)生根培养；(6)炼苗与移栽。本发明以大花萱草“蕾丝方巾”茎尖为外植体，通过外植体消毒和优化愈伤诱导、芽分化、复壮、生根培养基配方和炼苗培养条件，经过愈伤诱导、芽分化、复壮、生根培养及试管苗移栽阶段，实现大花萱草“蕾丝方巾”种苗的快速繁殖，组培苗移栽成活率达98％以上，为大花萱草快速繁殖、推广应用奠定基础。

主权项

大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）无菌材料的获得，一年四季均可取大花萱草“蕾丝方巾”茎尖，清洗干净后切成3小块1cm，用4－5％山农一号Ⅰ型溶液浸泡16 小时，浸泡液加入1/4 MS基本培养基的盐类，基本培养基采用MS基本培养基，其中白糖20g/L、琼脂5g/L，PH5.8，取出后接种在愈伤诱导培养基上；（2）愈伤诱导：在25±2℃，光强1500—2500 Lx，光照12h/d条件下，40天后茎尖可见明显的愈伤组织，暗培养20—30天；（3）芽分化：将愈伤组织接到芽分化诱导培养基上，在25±2℃，光强1500—2500 Lx，光照12h/d条件下，培养25天后开始芽分化形成丛生芽；（4）复壮培养：将丛生芽转接到壮苗培养基上，在25±2℃，光强1500—2500Lx，光照12h/d条件下，培养20—30天至苗高5cm以上；（5）生根培养：将壮苗转接到生根培养基上，在25±2℃，光强1500—2500Lx，光照12h/d条件下，培养15天后基部开始长根系；（6）炼苗与移栽：①炼苗：将长高至10cm、长根≥5根的组培苗带瓶移至普通大棚内，放置3－5天后打开瓶盖，在25—28℃，湿度70—80%，光强7000—8000Lx条件下，炼苗3—5天；移栽与培养：将炼苗后的组培苗洗净根部培养基，用0.1%多菌灵溶液浸泡根部30—60秒后，移栽至泥炭与珍珠岩的混合基质中，用塑料薄膜覆盖并盖上遮阴网，在25－30℃，湿度80—95%，光强宜先弱后强条件下，培育1周，后逐渐打开薄膜；2周后进入常规管理，培养1—2月后，即成种苗。