[发明专利]大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法

权利要求书

1.大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）无菌材料的获得，一年四季均可取大花萱草“蕾丝方巾”茎尖，清洗干净后切成3小块1cm，用4－5％山农一号Ⅰ型溶液浸泡16 小时，浸泡液加入1/4 MS基本培养基的盐类，基本培养基采用MS基本培养基，其中白糖20g/L、琼脂5g/L，PH5.8，取出后接种在愈伤诱导培养基上；

（2）愈伤诱导：在25±2℃，光强1500—2500 Lx，光照12h/d条件下，40天后茎尖可见明显的愈伤组织，暗培养20—30天；

（3）芽分化：将愈伤组织接到芽分化诱导培养基上，在25±2℃，光强1500—2500 Lx，光照12h/d条件下，培养25天后开始芽分化形成丛生芽；

（4）复壮培养：将丛生芽转接到壮苗培养基上，在25±2℃，光强1500—2500Lx，光照12h/d条件下，培养20—30天至苗高5cm以上；

（5）生根培养：将壮苗转接到生根培养基上，在25±2℃，光强1500—2500Lx，光照12h/d条件下，培养15天后基部开始长根系；

（6）炼苗与移栽：

①炼苗：将长高至10cm、长根≥5根的组培苗带瓶移至普通大棚内，放置3－5天后打开瓶盖，在25—28℃，湿度70—80%，光强7000—8000Lx条件下，炼苗3—5天；

移栽与培养：将炼苗后的组培苗洗净根部培养基，用0.1%多菌灵溶液浸泡根部30—60秒后，移栽至泥炭与珍珠岩的混合基质中，用塑料薄膜覆盖并盖上遮阴网，在25－30℃，湿度80—95%，光强宜先弱后强条件下，培育1周，后逐渐打开薄膜；2周后进入常规管理，培养1—2月后，即成种苗。

2.如权利要求1所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述愈伤诱导培养基为MS+山农一号Ⅱ型0.1%+6—BA1.8—2.3mg/L+NAA0.3—0.6mg/L。

3.如权利要求1所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述芽分化诱导培养基为MS+山农一号Ⅱ型0.1%+6—BA3.5—4.5mg/L+NAA0.18—0.2mg/L。

4.如权利要求1所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述生根培养基为1/2MS+山农一号Ⅱ型0.1%+IBA0.15—0.2mg/L+NAA0.05—0.1mg/L。

5.如权利要求1所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述壮苗培养基为MS+山农一号Ⅱ型0.1%+6—BA 0.3mg/L+NAA0.05mg/L。

6.如权利要求1或2所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述愈伤诱导培养基为MS+山农一号Ⅱ型0.1%+6—BA 2.0mg/L+NAA0.5mg/L。

7.如权利要求1或3所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述芽分化诱导培养基为MS+山农一号Ⅱ型0.1%+6—BA 4.0mg/L+NAA0.2mg/L。

8.如权利要求1或4所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述生根培养基为1/2MS+山农一号Ⅱ型0.1%+IBA 0.2mg/L+NAA0.1mg/L。

9.如权利要求1所述的大花萱草“蕾丝方巾”的组织培养方法，其特征在于，所述泥炭与珍珠岩的混合基质中，泥炭与珍珠岩的体积比为7∶3。