[发明专利]一种微生物胞外多糖及其制备方法

摘要

本发明公开了一种微生物胞外多糖及其制备方法，利用假单胞菌(Pseudomonas sp.)SFEP‑01进行胞外多糖的制备，发酵胞外多糖产率可达8‑12g/L，所产胞外多糖具有极强的凝胶活性、抗氧化活性、还原能力和清除超氧阴离子自由基的能力，该菌株所产胞外多糖主要含有两种成分：EPS Ⅰ和EPS Ⅱ，EPS Ⅰ为杂多糖，单糖残基为葡萄糖、甘露糖和鼠李糖，EPS Ⅱ为均一多糖，单糖残基为葡萄糖；所述菌株已于2016年1月14日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M2016035。所述菌株和多糖均具有良好研究开发前景。

主权项

1.一种微生物胞外多糖的制备方法，包括：1)利用保藏编号为CCTCCNo:M2016035的假单胞菌(Pseudomonas sp.)SFEP‑01发酵至发酵液呈凝胶状，得胞外多糖发酵液；2)将步骤1)得到的胞外多糖发酵液加水稀释，离心，收集上清液，真空浓缩至原体积，加乙醇进行醇沉，收集沉淀干燥后即获得胞外多糖粗品；3)取步骤2)制取的胞外多糖粗品，加缓冲液分散，经DEAE‑Sepharose FastFlow离子交换柱分离，得到EPSI和EPSII两个组分，分别收集EPSI和EPSII适当浓缩后再分别用葡聚糖凝胶G‑100柱层析，获得SFEP‑01菌株胞外多糖组分EPSI和EPSII纯品；步骤1)中假单胞菌(Pseudomonas sp.)SFEP‑01发酵的方法包括步骤如下：①将假单胞菌SFEP‑01接种于新鲜斜面菌种培养基上，25‑30℃培养1‑2天得活化菌体；②将步骤①制得的活化菌体接种于液体种子培养基中，25‑30℃培养8‑24小时，得种子液；③将步骤②制得的种子液接种至发酵培养基，25‑30℃发酵48－72小时至发酵液呈凝胶状，得胞外多糖发酵液。