[发明专利]一种蜜蜂巢脾多糖提取物及其制备方法

摘要

本发明公开一种蜜蜂巢脾多糖提取物及其制备方法，制备方法包括：将蜜蜂巢脾冷冻，粉碎、过筛后使用乙醚回流除蜡，除蜡后鼓风烘干，挥发乙醚得到巢脾干燥粉末；在巢脾干燥粉末中加入蒸馏水及木瓜蛋白酶进行酶解得到酶解液；将酶解液过滤，取上清液；在滤渣中加入蒸馏水及木瓜蛋白酶，重复酶解及过滤1‑2次；将上清液合并得到蜜蜂巢脾多糖提取液A；将蜜蜂巢脾多糖提取液A进行浓缩，离心后弃去沉淀得到蜜蜂巢脾多糖提取液B；往蜜蜂巢脾多糖提取液B中加入由氯仿和正丁醇配制成的混合液，抽提后离心，取上清液，获得蜜蜂巢脾多糖提取液C；往蜜蜂巢脾多糖提取液C中加入无水乙醇醇析后离心，弃上清液并干燥挥发干乙醇，得到蜜蜂巢脾多糖提取物。本发明适用于蜜蜂巢脾中多糖的提取。

主权项

1.一种蜜蜂巢脾多糖提取物的制备方法，其特征在于，包括步骤：步骤1、将蜜蜂巢脾冷冻后，粉碎、过筛后使用乙醚回流除蜡，除蜡后鼓风烘干，挥发乙醚，得到巢脾干燥粉末；其中，所述过筛具体为：过50‑120目筛；步骤2、在巢脾干燥粉末中加入巢脾干燥粉末质量15倍的蒸馏水后，加入木瓜蛋白酶进行酶解得到酶解液；其中，木瓜蛋白酶添加量为每100g巢脾干燥粉末添加7.2万U，酶解温度为50℃，酶解时间1.5h；步骤3、将所述酶解液通过120目纱布过滤，取上清液；步骤4、在进行步骤3操作后所得的滤渣中，再加入15倍的蒸馏水后，加入7.2万U/100g巢脾干燥粉末的木瓜蛋白酶，重复上述酶解及过滤操作1‑2次；将取得的上清液合并，到蜜蜂巢脾多糖提取液A；步骤5、将所述蜜蜂巢脾多糖提取液A在80‑100℃下进行浓缩1‑3h，离心后弃去沉淀得到蜜蜂巢脾多糖提取液B；步骤6、往蜜蜂巢脾多糖提取液B中加入占其体积1/4的由氯仿和正丁醇配制成的混合液，充分抽提20min后，进行4000r‑10000r/min的离心操作5‑20min，取上清液；其中，在制成的所述混合液中，氯仿和正丁醇的体积比为4∶1；对获取的所述上清液再重复本步骤的操作3次，获得去蛋白蜜蜂巢脾多糖提取液C；步骤7、往蜜蜂巢脾多糖提取液C中加入占其体积4倍的无水乙醇，在4℃下醇析12h，进行8000r/min的离心操作20min，弃上清液并鼓风干燥挥发干乙醇，得到蜜蜂巢脾多糖提取物，其中，蜜蜂巢脾多糖提取物的提取率达21.46％。