[发明专利]一种蜜蜂巢脾多糖提取物及其制备方法

说明书

本发明公开一种蜜蜂巢脾多糖提取物及其制备方法，制备方法包括：将蜜蜂巢脾冷冻，粉碎、过筛后使用乙醚回流除蜡，除蜡后鼓风烘干，挥发乙醚得到巢脾干燥粉末；在巢脾干燥粉末中加入蒸馏水及木瓜蛋白酶进行酶解得到酶解液；将酶解液过滤，取上清液；在滤渣中加入蒸馏水及木瓜蛋白酶，重复酶解及过滤1‑2次；将上清液合并得到蜜蜂巢脾多糖提取液A；将蜜蜂巢脾多糖提取液A进行浓缩，离心后弃去沉淀得到蜜蜂巢脾多糖提取液B；往蜜蜂巢脾多糖提取液B中加入由氯仿和正丁醇配制成的混合液，抽提后离心，取上清液，获得蜜蜂巢脾多糖提取液C；往蜜蜂巢脾多糖提取液C中加入无水乙醇醇析后离心，弃上清液并干燥挥发干乙醇，得到蜜蜂巢脾多糖提取物。本发明适用于蜜蜂巢脾中多糖的提取。

技术领域

本发明涉及一种蜂产品领域，尤其涉及一种蜜蜂巢脾多糖提取物及其制备方法。

背景技术

蜜蜂巢脾是蜜蜂生活、贮存食物、繁衍育子的场所，是一种天然的产物。它含有树脂、油脂、生物碱、鞣质、有机酸、氨基酸、蛋白质、酶类、昆虫激素、多糖以及苷类等多种生物活性成分。作为我国传统的动物中药，根据近年来的研究表明蜜蜂巢脾具有治疗鼻炎、急性乳腺炎、乙型肝炎等疾病的效果。

巢脾随着繁育蜜蜂世代的增加，成分也变得相当复杂。老巢脾含有大量蜜蜂生产和代谢的各种产物，如茧衣、蜂胶、蜂王浆、花粉、蜂蜜等物质。蜜蜂老巢脾的化学成份也较为复杂，研究发现蜜蜂巢脾水浸膏中含有多糖、生物碱、酶类、生物激素等成分。近年来，多糖所具有的各种生理功能逐渐为人们所重视，如增强免疫力、降低血糖浓度、降血脂、抗肿瘤、抗疲劳及抗衰老等种生理功能，在医药和食品领域显示了很好的应用前景，因而受到人们的广泛关注。而蜜蜂巢脾多糖的提取及应用尚处于空白。

发明内容

有鉴于此，本发明实施例提供一种蜜蜂巢脾多糖提取物及其制备方法，能够增加蜜蜂巢脾的利用价值。

为达到上述目的，本发明的实施例采用如下技术方案：

一方面，本发明实施例提供一种蜜蜂巢脾多糖提取物的制备方法，包括：

一种蜜蜂巢脾多糖提取物的制备方法，包括步骤：

步骤1、将蜜蜂巢脾冷冻后，粉碎、过筛后使用乙醚回流除蜡，除蜡后鼓风烘干，挥发乙醚，得到巢脾干燥粉末；

步骤2、在巢脾干燥粉末中加入巢脾干燥粉末质量10倍以上的蒸馏水后，加入木瓜蛋白酶进行酶解得到酶解液；其中，木瓜蛋白酶添加量为每100g巢脾干燥粉末添加7.2-12万U，酶解温度为40-60℃，酶解时间0.5-1.5h；

步骤3、将所述酶解液通过120目纱布过滤，取上清液；

步骤4、在进行步骤3操作后所得的滤渣中，再加入10倍以上的蒸馏水后，加入7.2-12万U/100g巢脾干燥粉末的木瓜蛋白酶，重复上述酶解及过滤操作1-2次；将取得的上清液合并，到蜜蜂巢脾多糖提取液A；

步骤5、将所述蜜蜂巢脾多糖提取液A在80-100℃下进行浓缩1-3h，离心后弃去沉淀得到蜜蜂巢脾多糖提取液B；

步骤6、往蜜蜂巢脾多糖提取液B中加入占其体积1/4的由氯仿和正丁醇配制成的混合液，充分抽提20min后，进行4000r-10000r/min的离心操作5-20min，取上清液；其中，在制成的所述混合液中，氯仿和正丁醇的体积比为4∶1；对获取的所述上清液再重复本步骤的操作3次，获得去蛋白蜜蜂巢脾多糖提取液C；

步骤7、往蜜蜂巢脾多糖提取液C中加入占其体积3-5倍的无水乙醇，在0-26℃下醇析4-24h后，进行4000r-10000r/min的离心操作10-30min，弃上清液并鼓风干燥挥发干乙醇，得到蜜蜂巢脾多糖提取物。