[发明专利]CRISPR-Cas9特异性敲除猪GGTA1基因的方法及用于特异性靶向GGTA1基因的sgRNA在审
| 申请号： | 201580000475.3 | 申请日： | 2015-06-11 |
| 公开（公告）号： | CN105492609A | 公开（公告）日： | 2016-04-13 |
| 发明（设计）人： | 蔡志明;牟丽莎;谢崇伟;张军方;陆赢;刘璐;高汉超;陈鹏飞 | 申请（专利权）人： | 深圳市第二人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 孙银行;彭愿洁 |
| 地址： | 518037 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种运用CRISPR-Cas9特异性敲除猪GGTA1基因的方法及用于特异性靶向GGTA1基因的sgRNA。本发明的特异性靶向GGTA1基因的sgRNA在GGTA1基因上的靶序列符合5’-N(20)NGG-3’的序列排列规则，其中N(20)表示20个连续的碱基，其中每个N表示A或T或C或G；在GGTA1基因上的靶序列位于GGTA1基因的N端的5个外显子编码区或与相邻内含子的交界处；在GGTA1基因上的靶序列是唯一的。本发明的sgRNA用于CRISPR-Cas9特异性敲除猪GGTA1基因的方法中，能够快速、精确、高效、特异性地敲除猪GGTA1基因，有效地解决构建GGTA1基因敲除猪周期长和成本高的问题。 | ||
| 搜索关键词： | crispr cas9 特异性 ggta1 基因 方法 用于 靶向 sgrna | ||
【主权项】：
在运用CRISPR‑Cas9特异性敲除猪GGTA1基因中用于特异性靶向GGTA1基因的sgRNA，其特征在于：（1）所述sgRNA在GGTA1基因上的靶序列符合5’‑N(20)NGG‑3’的序列排列规则，其中N(20)表示20个连续的碱基，其中每个N表示A或T或C或G，符合所述规则的靶序列位于正义链或反义链；（2）所述sgRNA在GGTA1基因上的靶序列位于GGTA1基因的N端的5个外显子编码区，或靶序列的一部分位于GGTA1基因的N端的5个外显子，其余部分跨越与相邻内含子的交界，位于相邻内含子；（3）所述sgRNA在GGTA1基因上的靶序列是唯一的。
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