[发明专利]一种鉴定γδT细胞杀伤的方法在审
| 申请号： | 201511013848.9 | 申请日： | 2015-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN105424582A | 公开（公告）日： | 2016-03-23 |
| 发明（设计）人： | 饶秀茸;崔博靖;付凡;马飞;王宇环 | 申请（专利权）人： | 深圳市合一康生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市福田区福保*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种简单快速鉴定γδT细胞的杀伤性方法，包括步骤：1）采集健康志愿者外周血，运用人淋巴细胞分离液分离得到单个核细胞，加入磷酸抗原HMBPP 10-30ng/ml和rhIL-2因子500-1000IU/ml进行对PBMC诱导成γδT细胞并扩增培养；2）在培养到第8-10天后开始对γδT细胞进行杀伤实验的检测，运用活细胞染料钙黄绿素－AM对肿瘤细胞染色，染色时的细胞密度要控制在105－107/ml；3）染色之后与γδT细胞共培养一段时间收细胞，检测前加入碘化丙锭染色，最后用流式细胞仪检测死亡细胞数量，得出细胞的杀伤率。本发明通过流式细胞仪上可以快速检测出细胞的杀伤效率的方法，克服经典的51Cr的放射性物质的污染和MTT，LDH的方法的灵敏度低的限制条件。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 细胞 杀伤 方法 | ||
【主权项】：
一种鉴定γδT细胞的杀伤性方法，包括步骤：1）采集健康志愿者外周血，运用人淋巴细胞分离液分离得到单个核细胞，加入磷酸抗原HMBPP 10‑30ng/ml和rhIL‑2因子500‑1000IU/ml进行对PBMC诱导成γδT细胞并扩增培养；2）在培养到第8‑10天后开始对γδT细胞进行杀伤实验的检测，运用活细胞染料钙黄绿素－AM对肿瘤细胞染色，染色时的细胞密度要控制在105－107/ml；3）染色之后与γδT细胞共培养一段时间收细胞，检测前加入碘化丙锭染色，最后用流式细胞仪检测死亡细胞数量，得出细胞的杀伤率。
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