[发明专利]一种鉴定γδT细胞杀伤的方法在审

专利信息
申请号: 201511013848.9 申请日: 2015-12-31
公开(公告)号: CN105424582A 公开(公告)日: 2016-03-23
发明(设计)人: 饶秀茸;崔博靖;付凡;马飞;王宇环 申请(专利权)人: 深圳市合一康生物科技股份有限公司
主分类号: G01N15/14 分类号: G01N15/14
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 518000 广东省深圳市福田区福保*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 鉴定 细胞 杀伤 方法
【权利要求书】:

1.一种鉴定γδT细胞的杀伤性方法,包括步骤:

1)采集健康志愿者外周血,运用人淋巴细胞分离液分离得到单个核细胞,加入磷酸抗原HMBPP10-30ng/ml和rhIL-2因子500-1000IU/ml进行对PBMC诱导成γδT细胞并扩增培养;

2)在培养到第8-10天后开始对γδT细胞进行杀伤实验的检测,运用活细胞染料钙黄绿素-AM对肿瘤细胞染色,染色时的细胞密度要控制在105-107/ml;

3)染色之后与γδT细胞共培养一段时间收细胞,检测前加入碘化丙锭染色,最后用流式细胞仪检测死亡细胞数量,得出细胞的杀伤率。

2.根据权利要求1所述鉴定γδT细胞杀伤的方法,其特征在于:所述γδT细胞细胞的杀伤性验证保护。

3.根据权利要求1所述鉴定γδT细胞杀伤的方法,其特征在于:对所述肿瘤细胞经过calcein-AM染色的条件保护。

4.根据权利要求1所述鉴定γδT细胞杀伤的方法,其特征在于:对所述肿瘤细胞与效应细胞共培养时所设计的条件的实验方法的保护。

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