[发明专利]提高β-胡萝卜素产量的方法

摘要

一种提高β-胡萝卜素产量的方法中，包括种子培养、发酵培养、混菌发酵液流加步骤，在发酵过程中加入三孢布拉氏霉正负菌发酵完成后所得发酵液，刺激菌体生产β-胡萝卜素，提高β-胡萝卜素的产率。相对现有技术，本发明不再提纯混菌发酵液中的三孢酸，而直接采用混菌发酵液，提高了发酵过程的可控性，可应用于大规模低复杂度的工业化生产，对比原来发酵条件，产量提高了67%。

主权项

一种提高β‑胡萝卜素产量的方法，包括以下步骤：(1)种子培养基将三孢布拉氏霉正负菌分别活化后转接到500mL三角瓶中，培养基装液量100mL，培养温度为27℃，摇床转速220rpm，培养时间为48‑52h；种子培养基组成为：玉米淀粉3.5％、黄豆饼粉2.3％、KH2PO4 0.15％、MgSO4·7H2O 0.01％、工业玉米浆1％、豆油0.5％；(2)发酵培养将上述正负菌种子液按比例接种到发酵培养基，发酵生产β‑胡萝卜素；向发酵过程中流加混菌发酵液；发酵培养基中按质量百分比包括：玉米淀粉3.0％、黄豆饼粉2.0％、KH2PO4 0.25％、MgSO4·7H2O 0.02％、豆油3.0％、工业玉米浆2.0％、维生素B1 0.005％、柠檬酸三钠0.3％、曲拉通0.1％、BHT 0.05％、混菌发酵液10％。发酵方法如下：以发酵培养基10％的体积比例且含正负菌1:4的比例将三孢布拉氏霉菌接种到5L的发酵罐中，获得接种后的培养基装液量3L，通风量1.0V/V,转速220r/min，27℃培养88h；发酵周期内40～88h，利用3mol/L的盐酸和3mol/L的氢氧化钠调控pH稳定在7.0～7.4，发酵结束后离心除去菌体；(3)混菌培养基的流加混菌培养基：玉米淀粉3.5％、黄豆饼粉2.3％、KH2PO4 0.15％、MgSO4·7H2O 0.01％、工业玉米浆1％、豆油0.5％；混菌菌液的培养条件:培养温度为27℃，摇床转速220rpm，培养时间为48‑52h；混菌发酵液：向发酵罐内流加相对于发酵罐内装液量体积2％～5％的混菌发酵液，以体积单位mL进行流加，流加时间点24～48h。