[发明专利]提高β-胡萝卜素产量的方法

权利要求书

1.一种提高β-胡萝卜素产量的方法，包括以下步骤：

(1)种子培养基

将三孢布拉氏霉正负菌分别活化后转接到500mL三角瓶中，培养基装液量100mL，培养温 度为27℃，摇床转速220rpm，培养时间为48-52h；

种子培养基组成为：玉米淀粉3.5％、黄豆饼粉2.3％、KH2PO40.15％、MgSO4·7H2O 0.01％、工业玉米浆1％、豆油0.5％；

(2)发酵培养

将上述正负菌种子液按比例接种到发酵培养基，发酵生产β- 胡萝卜素；向发酵过程中流加混菌发酵液；

发酵培养基中按质量百分比包括：玉米淀粉3.0％、黄豆饼粉2.0％、KH2PO4 0.25％、MgSO4·7H2O0.02％、豆油3.0％、工业玉米浆2.0％、维生素B1 0.005％、柠檬酸三钠0.3％、曲拉通0.1％、BHT0.05％、混菌发酵液10％。

发酵方法如下：以发酵培养基10％的体积比例且含正负菌1:4的比例将三孢布拉氏霉 菌接种到5L的发酵罐中，获得接种后的培养基装液量3L，通风量1.0V/V,转速220r/min ，27℃培养88h；发酵周期内40～88h，利用3mol/L的盐酸和3mol/L的氢氧化钠调控pH稳 定在7.0～7.4，发酵结束后离心除去菌体；

(3)混菌培养基的流加

混菌培养基：玉米淀粉3.5％、黄豆饼粉2.3％、KH2PO40.15％、MgSO4·7H2O 0.01％、工业玉米浆1％、豆油0.5％；

混菌菌液的培养条件:培养温度为27℃，摇床转速220rpm，培养时间为48-52h；

混菌发酵液：向发酵罐内流加相对于发酵罐内装液量体积2％～5％的混菌发酵液，以 体积单位mL进行流加，流加时间点24～48h。

2.根据权利要求1所述的提高β- 胡萝卜素产量的方法，其特征在于：在混菌发酵完成后对发酵液进行分离检测，包括以 下步骤：从5L发酵罐中取样，将发酵液进行抽滤，蒸馏水洗涤三次；精确称取抽滤后的 菌体0.03g，加入3mL左右乙酸乙酯，研磨菌体至无色；直至全部研磨液，用乙酸乙酯定 容至25mL；量取上述溶液1mL用乙酸乙酯定容至10mL；以乙酸乙酯为空白样，454nm处测 其吸光值；

产量计算公式为：产量＝0.01947×吸光度值mg/L。

3.根据权利要求1或2所述的提高β- 胡萝卜素产量的方法，其特征在于：步骤(3)中，向发酵罐中流加的混菌发酵液量为 发酵罐内装液量的4％。

4.根据权利要求3所述的提高β- 胡萝卜素产量的方法，其特征在于：步骤(3)中，混菌发酵液的流加时间点为48h。