[发明专利]传染性造血器官坏死病毒（IHNV）的RT-LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种传染性造血器官坏死病毒（IHNV） RT-LAMP检测引物组、检测试剂盒和检测方法。检测引物组包括一对外引物、一对内引物和一对环引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、DNA聚合酶、逆转录酶和对照；试剂盒还可以有显色剂。其检测方法是通过提取待检病毒RNA，利用逆转录酶的逆转录活性，采用六条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在63～65℃对样品RNA模板进行扩增，可检测到纯病毒RNA的pg级，其鉴定采用加入SYBR Green I ESE-Quant-tube Scanner仪器检测或者利用浊度仪观察反应管内沉淀的浊度变化判断扩增与否，确定待检样品是否含有传染性造血器官坏死病毒RNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。

主权项

一种传染性造血器官坏死病毒（IHNV）的RT‑LAMP检测引物组，包括一对外引物、一对内引物和一对环引物，其核苷酸序列分别如下所示：IHNV‑F3：CTATCTAGACGAACTGGTGAAG（SEQ ID NO:1）；IHNV‑B3：GTGAAGTTGGTAGCGTGAT（SEQ ID NO:2）；IHNV‑FIP：ATGCGGAGATCGGAACTTGGGCACGCCGAGATAATATCAA（SEQ ID NO:3）；IHNV‑BIP：TCTACGCTATGCACAAAGGCTCTCCTGTCCTTGGATACCTC（SEQ ID NO:4）；IHNV‑LF：ATAGGAGGTATGGAGTCACACT（SEQ ID NO:5）；IHNV‑LB：CATGACGGTCGTTGTGGA（SEQ ID NO:6）。