[发明专利]一种野生山桃稠李组织培养方法

摘要

一种野生山桃稠李组织培养方法，它涉及一种野生山桃稠李组织培养方法。本发明要解决野生山桃稠李组织培养方法效果差的问题。本发明的方法为：1)外植体的选取、2)外植体消毒、3)初代培养、4)不定芽的增殖培养、5)壮苗培养、6)生根培养。采用本发明的方法带顶芽的侧芽萌发率高达82.8％，无菌萌发率达到61.3％，增殖系数达到4.89，生根率91.2％。本发明的方法能较好的保持母本的抗逆性和观赏性，大大缩短了育苗周期，5个月即可获得生根苗木，有效提高了山桃稠李的繁殖系数；与种子繁殖相比，组织培养可以有效的提供低成本的高观赏性的绿化苗木，能有效降低苗木成本，节省开支。

主权项

一种野生山桃稠李组织培养方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：一、外植体的选取：外植体选取野外山桃稠李植株；二、外植体消毒：取带顶芽的侧芽作为外植体剪成4～5cm的带芽茎段，采用洗衣粉清洗干净，然后再用清水冲洗1～2h；置于超净工作台上用体积百分含量为75％的乙醇浸泡30s，用无菌水冲洗3次，放在无菌滤纸上风干，再用质量百分含量为0.1％升汞消毒8min，然后用无菌水冲洗3次；三、初代培养：将消毒外植体剪成1cm的茎段接入初代培养基中培养，培养条件为：培养温度为20～24℃，光照强度为2 000lx，光照时间每天12h，培养30天；所述初代培养基由改良WPS培养基+浓度为1.0mg/L的6‑苄氨基腺嘌呤+浓度为0.5mg/L的萘乙酸组成；四、不定芽的增殖培养：将初代培养的带芽茎段接入增殖培养基中培养，培养条件为：培养温度为20～24℃，光照强度为2 000lx，光照时间每天12h，培养周期为40天；所述增殖培养基由改良WPS+浓度为1.5mg/L的6‑苄氨基腺嘌呤+浓度为0.5mg/L的萘乙酸组成；五、壮苗培养：将在增殖培养基中培养至长度达到1cm以上的不定芽逐个切下，接入1/2改良WPS培养基中培养，培养条件为：培养温度为20～24℃，光照强度为2 000lx，光照时间每天12h，培养周期为40天；六、生根培养：将壮苗培养基中的健康健壮的芽接入生根培养基中培养，培养条件为：培养温度为20～24℃，光照强度为2 000lx，光照时间每天12h，培养30天；所述的生根培养基由1/4改良WPS培养基+浓度为0.5mg/L的萘乙酸组成；所述的改良WPS培养基由大量元素、微量元素、铁盐和有机成分组成：所述的大量元素为：浓度为400mg/L的硝酸铵、浓度为190mg/L的硝酸钾、浓度为170mg/L的磷酸二氢钾、浓度为370mg/L的硫酸镁和浓度为684mg/L的硝酸钙；所述的微量元素为：浓度为27.85mg/L的硫酸亚铁和浓度为37.28mg/L的乙二胺四乙酸盐；所述的铁盐为：浓度为22.5mg/L的硫酸锰、浓度为8.6mg/L的硫酸锌、浓度为0.25mg/L的硫酸铜、浓度为6.2mg/L的硼酸和浓度为0.25mg/L的钼酸钠；所述的有机成分为：浓度为0.1mg/L的盐酸硫胺素、浓度为0.5mg/L的盐酸吡哆辛、浓度为0.5mg/L的烟酸、浓度为2.0mg/L的甘氨酸和浓度为100mg/L的肌醇。