[发明专利]分离式DNA支点介导的链置换反应用于17β-雌二醇的检测方法及检测试剂盒有效
| 申请号： | 201510706106.8 | 申请日： | 2015-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN105256037B | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 陈俊华;温俊林;庄莉;周顺桂 | 申请（专利权）人： | 广东省生态环境与土壤研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 胡辉 |
| 地址： | 510650 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分离式DNA支点介导的链置换反应用于17β‑雌二醇的检测方法及检测试剂盒。试剂盒包括缓冲体系和核酸序列A、B、C、D、E和F，序列A是17β‑雌二醇的核酸适体，能与之特异性结合，把A‑B双链的B置换下来；B与C、D形成B‑C‑D复合物；利用B‑C‑D中的DNA支点，与E‑F反应，启动链置换反应，可把修饰荧光基团的核酸从与修饰淬灭基团的核酸的结合中置换下来，从而发出较强的荧光。本发明操作简单、经济实惠、无需固定洗涤分离过程，适于快速检测，适于在基层推广，具有广泛的应用价值。本发明方法具有较高的灵敏度，可检测到0.3 nM的17β‑雌二醇，线性范围为1 nM到400 nM。 1 | ||
| 搜索关键词： | 雌二醇 链置换反应 检测试剂 核酸 介导 修饰 置换 特异性结合 淬灭基团 核酸适体 核酸序列 缓冲体系 快速检测 洗涤分离 荧光基团 复合物 可检测 灵敏度 试剂盒 序列A 检测 荧光 双链 应用 基层 | ||
【主权项】：
1.一种分子检测试剂盒，包括核酸序列、缓冲体系，其特征在于：核酸序列由核酸序列A、B、C、D、E和F组成；其中序列A为待测分子的核酸适体；A中的部分序列与B互补；序列B具有a区和b区；序列C具有a*区和c区；序列D具有d区和b*区；序列E具有c*区和d*区；E的一端修饰有荧光基团或淬灭基团；序列F具有c区；F的一端修饰有与E对应的淬灭基团或荧光基团；其中上述a、b、c、d区分别与a*、b*、c*、d*区序列互补配对。
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