[发明专利]分离式DNA支点介导的链置换反应用于17β-雌二醇的检测方法及检测试剂盒有效
| 申请号： | 201510706106.8 | 申请日： | 2015-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN105256037B | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 陈俊华;温俊林;庄莉;周顺桂 | 申请（专利权）人： | 广东省生态环境与土壤研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 胡辉 |
| 地址： | 510650 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 雌二醇 链置换反应 检测试剂 核酸 介导 修饰 置换 特异性结合 淬灭基团 核酸适体 核酸序列 缓冲体系 快速检测 洗涤分离 荧光基团 复合物 可检测 灵敏度 试剂盒 序列A 检测 荧光 双链 应用 基层 | ||
1.一种分子检测试剂盒，包括核酸序列、缓冲体系，其特征在于：核酸序列由核酸序列A、B、C、D、E和F组成；其中序列A为待测分子的核酸适体；A中的部分序列与B互补；
序列B具有a区和b区；序列C具有a*区和c区；序列D具有d区和b*区；序列E具有c*区和d*区；E的一端修饰有荧光基团或淬灭基团；序列F具有c区；F的一端修饰有与E对应的淬灭基团或荧光基团；其中上述a、b、c、d区分别与a*、b*、c*、d*区序列互补配对。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：a、b、c区序列的长度独立为9～21个碱基。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：序列D的d区域可作为DNA支点，其序列长度为4-10个碱基。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：荧光基团包括FAM、Cy3、Cy5。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：淬灭基团包括BHQ、金纳米颗粒、量子点、石墨烯。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：缓冲体系为含盐离子浓度的缓冲体系。
7.一种17β-雌二醇检测试剂盒，包括核酸序列、缓冲体系，其特征在于：核酸序列由核酸序列A、B、C、D、E和F组成，其中
序列A：5'-GCTTCCAGCTTATTGAATTACACGCAGAGGGTAGCGGCTCTGCGCATTCAATTGCTGCGCGCTGAAGCGCGGAAGC-3'（SEQ ID NO：1）；
序列B:5'-TGCGCAGAGCCGCTA( b )CCCTCTGCGTGTAAT( a )-3'（SEQ ID NO：2）；
序列C:5'-ATTACACGCAGAGGG( a* )AACTGCTAGCTTCAG( c )-3'（SEQ ID NO：3）；
序列D:5'-AGCTAC( d )TAGCGGCTCTGCGCA( b* )-3'（SEQ ID NO：4）；
序列E:5'-FAM-CTGAAGCTAGCAGTT（ c*）GTAGCT（ d*）-3'（SEQ ID NO：5）；
序列F:5'-AACTGCTAGCTTCAG（c）-BHQ-3'（SEQ ID NO：6）。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：缓冲体系是10 mM Tris-HCl缓冲液，pH=8。
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