[发明专利]一种一型极化树突状细胞及其诱导方法和应用

摘要

本发明提供了一种一型极化树突状细胞及其诱导方法和应用，利用脐带血自然杀伤细胞(Natural Killer cell，NK)在DC细胞激活适应性免疫过程中的辅助作用，建立了一种新的DC1细胞制备方法，制备过程减少了细胞因子的使用，降低了成本，提高了质量控制；同时本发明还提供了将制备的DC1细胞用于制备肿瘤抗原特异性CTL细胞的方法，DC1细胞负载肿瘤特异性抗原之后，一部分细胞回输至患者体内，另一部分用于体外肿瘤抗原特异性的诱导细胞毒性T细胞(CTL)，通过体内/体外，主动诱导/被动诱导相结合的方式激活肿瘤特异性的免疫反应。

主权项

一种体外诱导一型极化树突状细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，制备NK细胞的培养基上清：K562细胞与NK细胞按1:2至1:10比例共培养并加入IFN alpha，24‑48小时后收集培养基上清；步骤2，分离外周血中的单核细胞，细胞短暂贴壁培养之后，移除悬浮细胞，加入诱导剂GM‑CSF和IL‑4进行培养，培养第3天，第5天更换一半量的培养基，获得成熟DC细胞；步骤3，所述步骤2中制得的成熟DC细胞用含INFγ以及所述步骤1中的NK细胞的培养基上清进一步培养诱导两天，使所述的成熟DC细胞分化为DC1细胞。