[发明专利]一种用于端粒酶检测的探针、方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于检测端粒酶活性的亲疏水可控的复合探针，以及用该类探针来检测端粒酶活性的方法和试剂盒。本发明的复合探针由共轭芴分子CF与端粒酶引物Ts通过酰胺键结合。通过调控亲水材料在复合探针中的比例，可改变复合探针的亲/疏水性能。在有端粒酶存在时，本发明的复合探针在一定的条件下会以TTAGGG重复片段扩增，扩增产物中的疏水材料CF在均相水溶液中以分散状态存在，释放荧光。将其用荧光仪检测，即可得到不同浓度的端粒酶样品对应的荧光强度。本发明的检测方法制备和操作简单，灵敏度高，检测成本低，所需样品少，响应迅速且特异性好。

主权项

1.一种试剂盒，其特征在于，应用如下方法检测端粒酶活性：所述方法为使用复合探针检测端粒酶活性的方法，复合探针由聚集猝灭的共轭芴CF分子与端粒酶引物Ts通过酰胺键结合，其为CF‑c‑Ts，其中，所述端粒酶引物Ts包括如SEQ NO:1所示的核苷酸序列；所述共轭芴CF分子的结构式为：其中，R为C₁‑C₁₀的直链烷基；所述方法包括：将所述的复合探针与待测样品接触，并在下述条件下孵育，所述条件足以使在待测样品中端粒酶的催化下，复合探针上的DNA片段扩增，扩增产物中的疏水材料CF在均相水溶液中以分散状态存在，释放荧光；对得到的混合物应用检测手段，以读出荧光强度；其中与不含有待检测细胞的对照或已知数据集相比的荧光强度提供了待测样品中端粒酶的活性水平。