[发明专利]一种用于端粒酶检测的探针、方法及试剂盒有效
| 申请号: | 201510670777.3 | 申请日: | 2015-10-13 |
| 公开(公告)号: | CN105176990B | 公开(公告)日: | 2019-04-12 |
| 发明(设计)人: | 夏帆;贾永梅;苗茂;娄筱叮 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6886;C12Q1/48;C12N15/10 |
| 代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 曹葆青 |
| 地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 端粒 检测 探针 方法 试剂盒 | ||
1.一种试剂盒,其特征在于,应用如下方法检测端粒酶活性:
所述方法为使用复合探针检测端粒酶活性的方法,复合探针由聚集猝灭的共轭芴CF分子与端粒酶引物Ts通过酰胺键结合,其为CF-c-Ts,其中,所述端粒酶引物Ts包括如SEQ NO:1所示的核苷酸序列;所述共轭芴CF分子的结构式为:其中,R为C1-C10的直链烷基;
所述方法包括:将所述的复合探针与待测样品接触,并在下述条件下孵育,所述条件足以使在待测样品中端粒酶的催化下,复合探针上的DNA片段扩增,扩增产物中的疏水材料CF在均相水溶液中以分散状态存在,释放荧光;对得到的混合物应用检测手段,以读出荧光强度;其中与不含有待检测细胞的对照或已知数据集相比的荧光强度提供了待测样品中端粒酶的活性水平。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,在待测样品中端粒酶的催化下,复合探针上的DNA片段以TTAGGG重复片段扩增。
3.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,还包括dNTPs和端粒酶扩增缓冲溶液。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,该方法的检测下限为28cell/μL。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述方法适用于膀胱癌患者的尿液检测。
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