[发明专利]一种DC-CIK细胞培养试剂及其培养方法

摘要

本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种DC‑CIK细胞培养试剂及其培养方法。该培养试剂包括DC细胞培养试剂、CIK细胞培养试剂和共培养试剂；DC细胞培养试剂包括第一DC细胞培养试剂和第二DC细胞培养试剂；第一DC细胞培养试剂包括GM‑SCF和IL‑4；第二DC细胞培养试剂包括GM‑SCF、IL‑4、TNF‑α和MDC。通过本发明提供的培养方法得到的DC细胞和DC‑CIK细胞量大，DC‑CIK有效细胞CD3+CD56+比例高，对肿瘤的杀伤能力更强。

主权项

1.一种DC‑CIK细胞培养试剂，其特征在于，由DC细胞培养试剂、CIK细胞培养试剂、共培养试剂组成；所述DC细胞培养试剂由第一DC细胞培养试剂和第二DC细胞培养试剂组成；所述第一DC细胞培养试剂由GM‑SCF、IL‑4和含有体积百分含量5％～15％血浆的无血清培养基组成；所述第一DC细胞培养试剂中，GM‑CSF的浓度为100～1000U/mL，IL‑4的浓度为100～1000U/mL；所述第二DC细胞培养试剂由GM‑SCF、IL‑4、TNF‑α、MDC和含有体积百分含量5％～15％血浆的无血清培养基组成；所述第二DC细胞培养试剂中，GM‑SCF的浓度为50～500U/mL，IL‑4的浓度为50～500U/mL，TNF‑α的浓度为100～1000U/mL，MDC的浓度为1～20ng/mL；所述CIK细胞培养试剂由第一CIK细胞培养试剂和第二CIK细胞培养试剂组成；所述第一CIK细胞培养试剂由INF‑γ和含有体积百分含量5％～15％血浆的无血清培养基组成；所述第一CIK细胞培养试剂中，INF‑γ的浓度为500～2000U/mL；所述第二CIK细胞培养试剂由OKT‑3、IL‑1α、IL‑2和含有体积百分含量5％～15％血浆的无血清培养基组成；所述第二CIK细胞培养试剂中，OKT‑3的浓度为10～100ng/mL，IL‑1α的浓度为50～200U/mL，IL‑2的浓度为100～1000U/mL；所述共培养试剂由IL‑2和含有体积百分含量5％～15％血浆的无血清培养基组成；所述共培养试剂中，IL‑2的浓度为100～500U/mL。