[发明专利]一种食品中微生物快速检测方法

摘要

本发明属于食品检测领域，提供一种食品中微生物快速检测方法及检测前快速处理装置。该方法包括(1)食品预处理；(2)第一次膜过滤(3)第二次膜过滤(4)微生物细胞裂解‑ATP检测前一体化处理(5)微生物检测。所述装置包括：瓶体(1)，与瓶体内壁紧密贴合的活塞(2)，活塞杆(3)，第一过滤膜(4)、细胞裂解‑ATP检测前一体化处理室(6)、第二过滤膜(8)。利用本发明方法对食品样品进行预处理，能够有效消除食品本身对检测体系的影响。本发明装置也提供一种方便、快速、高效的食品中微生物检测前快速方式，减少操作过程中不必要的步骤，更可以消除食品本身所携带的细胞及游离ATP的影响，提高检测准确性，轻巧方便。

主权项

1.一种食品中微生物快速检测方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)食品预处理：用拭子轻拭样品表面后，将拭子置于无菌的4.5‑5ml 0.1‑0.2M pH 7.0‑7.4的PBS缓冲液中荡洗干净，获得样品液；(2)第一次膜过滤：室温下，将上述步骤(1)获得的样品液通过孔径为10‑20um的过滤膜，得到过滤液1；(3)第二次膜过滤：室温下，将上述步骤(2)获得的过滤液1通过孔径为0.2～0.5um的过滤膜，截获食品中微生物细胞；(4)微生物细胞裂解—ATP检测前一体化处理：将步骤(3)截获的微生物细胞通过细胞裂解与ATP检测一体化试剂，室温下反应10‑15s，获得样品处理液；其中，细胞裂解与ATP检测一体化试剂为：1‑2％Triton X‑100、100‑120mmol NaCl、0.1‑0.5％脂肽类表面活性剂、2‑2.5ul荧光素酶，0.1‑0.15mg/ml荧光素，1‑1.5mM DTT，4.5‑5mM MgSO4，20‑25mM N‑三(羟甲基)甲基甘氨酸，pH 7.8；反应量为：每100ul上述一体化试剂加入1.5‑2ul样品液；(5)微生物检测：利用酶标仪测定样品处理液的光度值，记录10‑15s内光输出量；根据光输出量与菌落数的线性关系，计算出样品处理液的菌落数。