[发明专利]一种食品中微生物快速检测方法有效
| 申请号： | 201510575245.1 | 申请日： | 2015-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN105203510B | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 黄和;徐晴;王磊;毕建成;贺沧 | 申请（专利权）人： | 镇江泰和益元生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N1/28;G01N1/34 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛;杨秀丽 |
| 地址： | 212400 江苏省镇江市句容*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 食品 微生物 快速 检测 方法 处理 装置 | ||
【权利要求书】：
1.一种食品中微生物快速检测方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：
(1)食品预处理：用拭子轻拭样品表面后，将拭子置于无菌的4.5-5ml 0.1-0.2M pH7.0-7.4的PBS缓冲液中荡洗干净，获得样品液；
(2)第一次膜过滤：室温下，将上述步骤(1)获得的样品液通过孔径为10-20um的过滤膜，得到过滤液1；
(3)第二次膜过滤：室温下，将上述步骤(2)获得的过滤液1通过孔径为0.2～0.5um的过滤膜，截获食品中微生物细胞；
(4)微生物细胞裂解—ATP检测前一体化处理：将步骤(3)截获的微生物细胞通过细胞裂解与ATP检测一体化试剂，室温下反应10-15s，获得样品处理液；
其中，细胞裂解与ATP检测一体化试剂为：1-2％Triton X-100、100-120mmol NaCl、0.1-0.5％脂肽类表面活性剂、2-2.5ul荧光素酶，0.1-0.15mg/ml荧光素，1-1.5mM DTT，4.5-5mM MgSO4，20-25mM N-三(羟甲基)甲基甘氨酸，pH 7.8；反应量为：每100ul上述一体化试剂加入1.5-2ul样品液；
(5)微生物检测：利用酶标仪测定样品处理液的光度值，记录10-15s内光输出量；根据光输出量与菌落数的线性关系，计算出样品处理液的菌落数。
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