[发明专利]一种体外刺激外周血γδT细胞高效增殖的方法及其应用有效
| 申请号： | 201510526396.8 | 申请日： | 2015-08-25 |
| 公开（公告）号： | CN105112370B | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 卓朗;王晖;王珂 | 申请（专利权）人： | 杭州优善生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112 | 代理人： | 王静;丁业平 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市滨江区*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明属于医学生物工程领域，具体涉及一种体外刺激外周血γδT细胞高效增殖的方法及其应用。扩增方法包括使用饲养层细胞，OKT3抗体，白细胞介素‑2和唑来膦酸。上述饲养层细胞是一种K562细胞在其基因组的靶向位点上特异性的插入了CD64，CD86，和CD137L基因。用唑来膦酸和白细胞介素‑2增加外周血γδT细胞比例后，基因的蛋白产物与OKT3抗体和白细胞介素‑2联合作用，可刺激γδT细胞大量扩增。扩增后的γδT细胞可用于杀死唑来膦酸预处理过的肿瘤细胞或经基因工程手段修饰表达嵌合性抗原受体(CAR)来直接杀死肿瘤细胞。此方法获得的γδT细胞具备完整的抗肿瘤细胞毒性，可杀死实体肿瘤细胞和非实体肿瘤细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 刺激 外周血 细胞 高效 增殖 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种体外刺激外周血Vγ9Vδ2T细胞高效增殖的方法，其特征在于，所述方法为：1)将目的基因CD64，CD86，和CD137L插入到K562细胞的基因座中得到单克隆细胞株；2)从外周血中分离单个核细胞，并用唑来膦酸和白细胞介素‑2预处理外周血单个核细胞；3)预处理过的外周血单个核细胞与遗传修饰过的K562细胞共同培养，并加入OKT3抗体和白细胞介素‑2。
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