[发明专利]一种磁性固定化芽胞漆酶及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201510493134.6 | 申请日： | 2015-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN105018460B | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 管政兵;周稳;廖祥儒;蔡宇杰;伊海希 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14;C02F3/34;C02F103/30 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种磁性固定化芽胞漆酶及其制备方法与应用，属于固定化技术领域和废水处理领域。本发明公开的固定化芽胞漆酶以Fe3O4磁性纳米粒子为载体，通过双功能交联剂将磁性纳米粒子直接固定在芽胞表面；其可通过外加磁场进行快速分离，并反复使用。本发明公布的磁性芽胞漆酶制备方法不需要对磁性纳米粒子进行表面修饰，其过程仅包含芽胞的制备、固定化处理和收集三个步骤，大大降低了制备过程的操作要求，还大大节约了固定化芽胞漆酶的制备成本。本发明提供的磁性固定化芽胞漆酶可直接用于染料的脱色处理，并保持较高的脱色效率。 | ||
| 搜索关键词： | 芽胞 漆酶 制备 磁性纳米粒子 磁性固定 脱色 固定化 废水处理领域 双功能交联剂 固定化处理 固定化技术 表面修饰 操作要求 快速分离 三个步骤 外加磁场 芽胞表面 直接固定 制备过程 染料 应用 节约 | ||
【主权项】：
1.一种磁性固定化芽胞漆酶，其特征在于，以未经表面修饰的Fe3O4磁性纳米粒子为载体，通过双功能交联剂将磁性纳米粒子结合在芽胞表面，其具体制备方法包括以下步骤：(1)制备芽胞杆菌属菌株所产的芽胞；(2)固定：称取0.1g其粒径为5－30nm的Fe3O4磁性纳米粒子，加入到5－15ml 0.02M pH 7、其中含有浓度为0.1M的NaCl的Na2HPO4－NaH2PO4缓冲液中，加入0.5－2.0ml浓度为4mg/ml的碳二亚胺盐酸盐，超声处理10min，接着加入0.1－1.0ml湿重为100mg/ml的芽胞，超声处理30min，然后置于50－250rpm，4－40℃条件下旋转振荡20－240min；(3)回收：将完成固定化的混合液通过磁铁吸附进行分离，用缓冲液冲洗1－5次，分别收集上清液和固定化芽胞，保藏于0－40℃。
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