[发明专利]一种磁性固定化芽胞漆酶及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201510493134.6 | 申请日： | 2015-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN105018460B | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 管政兵;周稳;廖祥儒;蔡宇杰;伊海希 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14;C02F3/34;C02F103/30 |
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| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 芽胞 漆酶 制备 磁性纳米粒子 磁性固定 脱色 固定化 废水处理领域 双功能交联剂 固定化处理 固定化技术 表面修饰 操作要求 快速分离 三个步骤 外加磁场 芽胞表面 直接固定 制备过程 染料 应用 节约 | ||
1.一种磁性固定化芽胞漆酶，其特征在于，以未经表面修饰的Fe3O4磁性纳米粒子为载体，通过双功能交联剂将磁性纳米粒子结合在芽胞表面，其具体制备方法包括以下步骤：
(1)制备芽胞杆菌属菌株所产的芽胞；
(2)固定：称取0.1g其粒径为5－30nm的Fe3O4磁性纳米粒子，加入到5－15ml 0.02M pH7、其中含有浓度为0.1M的NaCl的Na2HPO4－NaH2PO4缓冲液中，加入0.5－2.0ml浓度为4mg/ml的碳二亚胺盐酸盐，超声处理10min，接着加入0.1－1.0ml湿重为100mg/ml的芽胞，超声处理30min，然后置于50－250rpm，4－40℃条件下旋转振荡20－240min；
(3)回收：将完成固定化的混合液通过磁铁吸附进行分离，用缓冲液冲洗1－5次，分别收集上清液和固定化芽胞，保藏于0－40℃。
2.权利要求1所述的磁性固定化芽胞漆酶，其特征在于，其制备步骤(2)所述的磁性纳米粒子粒径为20nm。
3.权利要求1所述的磁性固定化芽胞漆酶，其特征在于，其制备步骤(2)所述的固定化体系为0.1g Fe3O4磁性纳米粒子:10ml Na2HPO4－NaH2PO4缓冲液:0.5ml碳二亚胺盐酸盐:0.5ml芽胞。
4.权利要求1所述的磁性固定化芽胞漆酶，其特征在于，其制备步骤(2)所述固定化混合物经超声处理后在200rpm，37℃条件下旋转振荡30min。
5.权利要求1所述的固定化芽胞漆酶在染料脱色处理中的应用。
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