[发明专利]新型shRNA表达载体及其制备和应用

摘要

本发明公开了高效引发RNAi的新型核酶增强型shRNA及其制备方法和应用。所述核酶增强型shRNA从5′端到3′端依次为(a)5′端配对区域；(b)顶端环区域；(c)3′端配对区域，并且所述5′端配对区域与3′端配对区域形成双链区域，所述双链区域长度大于或等于19bp；(d)3′端未配对区域；(e)与3′端未配对区域相连的核酶区，所述核酶增强型shRNA可产生siRNA，且所述siRNA的核苷酸序列对应于所述3′端或5′端配对区域。本发明核酶增强型shRNA加工生成siRNA的效率显著提高，对靶基因的抑制效率更高。

主权项

一种核酶增强型shRNA，所述核酶增强型shRNA的核苷酸序列从5′端到3′端依次具有以下区域：(a)5′端配对区域，所述5′端配对区域长度大于或等于19nt；(b)顶端环区域，所述顶端环区域长度大于或等于2nt；(c)3′端配对区域，所述3′端配对区域长度大于或等于19nt，并且所述5′端配对区域与3′端配对区域形成双链区域，所述双链区域长度大于或等于19bp；(d)3′端未配对区域，所述3′端未配对区域长度为0‑6nt；(e)与3′端未配对区域相连的核酶区，所述核酶区编码具有自切割功能的核酶，其中，所述核酶增强型shRNA产生siRNA，且所述siRNA的核苷酸序列对应于所述3′端配对区域或5′端配对区域。