[发明专利]一种基于聚电解质多层膜基片电泳流动型ELISA方法在审
| 申请号： | 201510316659.2 | 申请日： | 2015-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN105158460A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 申鹤云;张芳芳 | 申请（专利权）人： | 北京化工大学 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 | 代理人： | 张慧 |
| 地址： | 100029 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于聚电解质多层膜基片电泳流动型ELISA方法，属于生物材料领域。第一抗体吸附在多孔膜表面，再进行封闭剂蛋白吸附；电泳驱动抗原-第一抗体反应；第二抗体-抗原反应，对酶标第二抗体进行显色定量：电泳驱动抗原-第一抗体反应后，将电泳后的多孔膜基片放入到第二抗体溶液中，进行反应，然后清洗，将所得多孔膜基片放入第二抗体标识酶的底物溶液中，进行显色；通过检测吸光度，进行抗原定量分析。优选正电性PDDA/PSS修饰醋酸纤维素膜PEMs-CA。本发明中PEMs的修饰降低了非特异性吸附，电泳驱动力使抗原分子短时间内局部浓缩到第一抗体周围，实现了快速灵敏的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 电解质 多层 膜基片 电泳 流动 elisa 方法 | ||
【主权项】：
电泳流动型ELISA方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将第一抗体吸附到多孔膜基片上；(2)吸附第一抗体的多孔膜基片再进行封闭剂蛋白吸附；(3)电泳驱动抗原‑第一抗体反应：将步骤(2)第一抗体和封闭剂蛋白吸附后的多孔膜基片固定在电泳装置中，电泳装置中多孔膜基片一侧注入抗原溶液，多孔膜基片另一侧注入磷酸盐缓冲溶液，若抗原分子为负电荷则抗原溶液侧插入负电极，另一侧插入正电极，反之则反；电极加电压，进行抗原‑第一抗体反应；(4)第二抗体‑抗原反应，对酶标第二抗体进行显色定量：步骤(3)电泳驱动抗原‑第一抗体反应后，将电泳后的多孔膜基片放入到第二抗体溶液中，进行反应，然后清洗，将所得多孔膜基片放入第二抗体标识酶的底物溶液中，进行显色；通过检测吸光度，进行抗原定量分析。
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