[发明专利]一种诱导iPSCs分化为胰岛β细胞的方法在审

专利信息
申请号: 201510296707.6 申请日: 2015-06-02
公开(公告)号: CN104911141A 公开(公告)日: 2015-09-16
发明(设计)人: 周汉新;肖亮;周雅君 申请(专利权)人: 深圳市第二人民医院
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071
代理公司: 深圳中一专利商标事务所 44237 代理人: 张全文
地址: 518000 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明适用于生物医学领域,提供了一种诱导iPSCs分化为胰岛β细胞的方法,包括以下步骤,提供iPSCs,并使用培养基A进行培养;待所述iPSCs生长至90%以上融合时,使用collagenase IV进行消化处理,分离成iPSCs小团块细胞;将所述iPSCs小团块细胞接种于铺有MATRIGEL MATRIX的培养基上培养,待细胞生长至55-65%融合时,将所述细胞在培养基B中进行培养,得到细胞B;将所述细胞B在培养基C中进行培养,得到细胞C;将所述细胞C在培养基D中进行培养,得到细胞D;将所述细胞D在培养基E中进行培养,得到胰岛β细胞。
搜索关键词: 一种 诱导 ipscs 化为 胰岛 细胞 方法
【主权项】:
一种诱导iPSCs分化为胰岛β细胞的方法,包括以下步骤,提供iPSCs,并使用培养基A进行培养;待所述iPSCs生长至90%以上融合时,使用collagenase IV进行消化处理,分离成iPSCs小团块细胞;将所述iPSCs小团块细胞接种于铺有MATRIGEL MATRIX的培养基上培养,待细胞生长至55‑65%融合时,将所述细胞在培养基B中进行培养,得到细胞B,其中,所述培养基B为含有0.18‑0.22%的BSA、0.45‑0.55×N2、0.45‑0.55×B27、95‑105ng/mL activin A和0.08‑0.12μM wortmannin的DMEM/F12培养基;将所述细胞B在培养基C中进行培养,得到细胞C;将所述细胞C在培养基D中进行培养,得到细胞D;将所述细胞D在培养基E中进行培养,得到胰岛β细胞。
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