[发明专利]一种用于快速鉴定4型登革热病毒的RT-LAMP试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于快速鉴定4型登革热病毒的RT-LAMP试剂盒。所述试剂盒中包括一对外引物、一对内引物和一对环引物，序列分别如SEQ ID NO.1～6所示。检测试剂盒还包括引物液、反应液、DNA聚合酶、逆转录酶、对照和显色剂。其检测方法是通过提取待检病毒RNA，利用逆转录酶的逆转录活性，采用六条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在60～65℃对样品RNA模板进行扩增，加入显色剂观察反应管内的颜色变化来判断扩增与否。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。

主权项

一种用于快速鉴定4型登革热病毒的RT‑LAMP试剂盒，包括以下组分：（1）用于快速鉴定4型登革热病毒的RT‑LAMP特异性引物组；（2）逆转录酶；（3）DNA聚合酶；（4）RT‑LAMP反应液；（5）显色剂；（6）阳性对照和阴性对照；其中，所述用于快速鉴定4型登革热病毒的RT‑LAMP特异性引物组包括：内引物1：5’‑ CGTTATTGGCGGAGCTACAGGGAGGCTATTGAAGTCAGGC‑3’（SEQ ID No.1）；内引物2：5’‑GTGGACTAGCGGTTAGAGGAGAGAGACTACAGCTTCATCTCAC‑3’ （SEQ ID No.2）；外引物1：5’‑ GCTCCTTTCGAGAGTGAAG ‑3’（SEQ ID No.3）；外引物2：5’‑GGTCTCCTCTAACCTCTAGTC‑3’（SEQ ID No.4）；环引物1：5’‑CAGCACGGTTTGCTCAAG‑3’（SEQ ID No.5）；环引物2：5’‑ CCTTACAAATCGCAGCAACAA‑3’（SEQ ID No.6）。