[发明专利]一种Decoy核酸阳离子脂质体载体及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201510268568.6 申请日: 2015-05-22
公开(公告)号: CN104922068B 公开(公告)日: 2017-10-13
发明(设计)人: 肖扬;崔进龙;李正荣;叶青;何凌云;王雪根 申请(专利权)人: 江苏凯基生物技术股份有限公司;南京艾德凯腾生物医药有限责任公司
主分类号: A61K9/127 分类号: A61K9/127;A61K47/42;A61K31/711;A61P35/00
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 代理人: 黄天天
地址: 210008 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,它包括如下步骤(1)将二油酰磷脂酰乙醇胺和(2,3‑二油酰基‑丙基)‑三甲胺按质量比4∶1~1∶4混合,加入有机溶剂溶解得到混合溶液;(2)将步骤(1)得到的混合溶液完全蒸干有机溶剂,使用HEPES缓冲液溶解剩余的固体部分,先水合30~60min,再超声30~60min;(3)将步骤(2)处理后得到的混合体系先过0.4~0.8μm的膜,再过0.03~0.2μm的膜,制备粒径小、分布均匀的空白脂质体;(4)将空白脂质体与鱼精蛋白、Decoy核酸按照质量比(50~120)∶(10~20)∶1混合,2℃~8℃孵育12~24小时形成完整的Decoy核酸阳离子脂质体载体。本发明的Decoy核酸阳离子脂质体载体具有较高的入膜率高和入核率,同时不具有细胞毒性。
搜索关键词: 一种 decoy 核酸 阳离子 脂质体 载体 及其 制备 方法
【主权项】:
一种Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,它包括如下步骤:(1)将二油酰磷脂酰乙醇胺和(2,3‑二油酰基‑丙基)‑三甲胺按质量比4∶1~1∶4混合,加入有机溶剂溶解得到混合溶液;(2)将步骤(1)得到的混合溶液完全蒸干有机溶剂,使用HEPES缓冲液溶解剩余的固体部分,先水合30~60min,再超声30~60min;(3)将步骤(2)处理后得到的混合体系先过0.4~0.8μm的膜,再过0.03~0.2μm的膜,制备粒径小、分布均匀的空白脂质体;(4)将空白脂质体与鱼精蛋白、Decoy核酸按照质量比(50~120)∶(10~20)∶1混合,2℃~8℃孵育12~24小时形成完整的Decoy核酸阳离子脂质体载体。
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