[发明专利]一种Decoy核酸阳离子脂质体载体及其制备方法有效
申请号: | 201510268568.6 | 申请日: | 2015-05-22 |
公开(公告)号: | CN104922068B | 公开(公告)日: | 2017-10-13 |
发明(设计)人: | 肖扬;崔进龙;李正荣;叶青;何凌云;王雪根 | 申请(专利权)人: | 江苏凯基生物技术股份有限公司;南京艾德凯腾生物医药有限责任公司 |
主分类号: | A61K9/127 | 分类号: | A61K9/127;A61K47/42;A61K31/711;A61P35/00 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人: | 黄天天 |
地址: | 210008 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 decoy 核酸 阳离子 脂质体 载体 及其 制备 方法 | ||
1.一种Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,它包括如下步骤:
(1)将二油酰磷脂酰乙醇胺和(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺按质量比4∶1~1∶4混合,加入有机溶剂溶解得到混合溶液;
(2)将步骤(1)得到的混合溶液完全蒸干有机溶剂,使用HEPES缓冲液溶解剩余的固体部分,先水合30~60min,再超声30~60min;
(3)将步骤(2)处理后得到的混合体系先过0.4~0.8μm的膜,再过0.03~0.2μm的膜,制备粒径小、分布均匀的空白脂质体;
(4)将空白脂质体与鱼精蛋白、Decoy核酸按照质量比(50~120)∶(10~20)∶1混合,2℃~8℃孵育12~24小时形成完整的Decoy核酸阳离子脂质体载体。
2.根据权利要求1所述的Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的有机溶剂为三氯甲烷。
3.根据权利要求1或2所述的Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,每毫克二油酰磷脂酰乙醇胺和(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺的混合物中加入10ml有机溶剂。
4.根据权利要求1所述的Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,蒸干有机溶剂的方法是使用旋转蒸发器蒸干。
5.根据权利要求1所述的Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的HEPES缓冲液为3~5mol/L pH 7.4的HEPES缓冲液。
6.根据权利要求1所述的Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,水合温度为20℃~30℃;超声功率为100~200W。
7.根据权利要求1所述的Decoy核酸阳离子脂质体载体的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的膜为聚碳酸酯膜,所述混合体系先过0.4~0.8μm的膜10~20次,再过0.03~0.1μm的膜10~20次。
8.权利要求1~7中任意一项所述的制备方法制备得到Decoy核酸阳离子脂质体载体。
9.权利要求8所述的Decoy核酸阳离子脂质体载体在制备作为携带药物穿透细胞膜和细胞核的药物输送系统中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述的药物为Decoy核酸药物。
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