[发明专利]用于以RT‑LAMP法快速检测香蕉病毒的引物及方法

摘要

本发明属于农作物病害防治及植物检疫领域，特别涉及用于以RT‑LAMP法快速检测香蕉三种重要病毒(香蕉束顶病毒、香蕉线条病毒及黄瓜花叶病毒)的引物及其检测方法。所述引物包括BBTV引物组SEQ ID NO2～SEQ ID NO7、BSV引物组SEQ ID NO9～SEQ ID NO14和CMV引物组SEQ ID NO16～SEQ ID NO21中的至少一种。本发明还提供了一种利用上述引物以RT‑LAMP法快速检测香蕉重要病毒的检测方法。本发明直接以香蕉叶片RNA为模板同时检测香蕉DNA病毒和RNA病毒，采用RT‑LAMP反应，一步实现cDNA合成和LAMP反应，反应仅需1h。

主权项

用于以RT‑LAMP法快速检测香蕉重要病毒的引物，其特征在于：包括BBTV引物组、BSV引物组和CMV引物组，其中，BBTV引物组包括外引物对BBTV‑F3和BBTV‑B3，内引物对BBTV‑FIP和BBTV‑BIP，以及环引物对BBTV‑LF和BBTV‑LB；BSV引物组包括外引物对BSV‑F3和BSV‑B3，内引物对BSV‑FIP和BSV‑BIP，以及环引物对BSV‑LF和BSV‑LB；CMV引物组包括外引物对CMV‑F3和CMV‑B3，内引物对CMV‑FIP和CMV‑BIP，以及环引物对CMV‑LF和CMV‑LB，序列如下所示：BBTV‑F3：5'‑CTA CTG ATA AAA CAT TAC CCA GAT‑3'；BBTV‑B3：5'‑TCC CCA CTA CAT ACC AGT T‑3'；BBTV‑FIP：5'‑CTC TTG ATC ATA GCC CAA TGA AGT ATG GAA AAT GTT TAT GCT TCT TGT‑3'；BBTV‑BIP：5'‑TCT TGG GAA ATC AAC CAG CCG TAACCAGAT GGC TAT GTT CAG‑3'；BBTV‑LF：5'‑CGG GCT TCACCT TGC AC‑3'；BBTV‑LB：5'‑TCT GGAAGC CCC AGG TTT AT‑3'；BSV‑F3：5'‑ATG CTAGGA GCT ACATTC C‑3'；BSV‑B3：5'‑TCC ACT TAC ATA CCC CTC C‑3'；BSV‑FIP：5'‑CCA GTC CTG AGT ATT CAT TCT TCT TGA AAC TGG GAA AAA TCC TTG G‑3'；BSV‑BIP：5'‑GAA GTT GTA GCT AAT CTG CCA GAA TCC ATA CAG CCA TCC GTT‑3'；BSV‑LF：5'‑GGA CTC GTT TTG GCA TAC AGT G‑3'；BSV‑LB：5'‑CTT GAG TTA CCC CCC GAA AAA GC‑3'；CMV‑F3：5'‑CGT AAA GTT CCT GCC TCC TC‑3'；CMV‑B3：5'‑GGT GCT CGA TGT CAA CAT GA‑3'；CMVI‑FIP：5'‑GGC TTG AAC TCC AGA TGC AGC AGC CGC CAT CTC TGC TAT G‑3'；CMV‑BIP：5'‑TTC GGT GAT GCG CGC TGA TAG TCT CGA GCG CAT CGT CT‑3'；CMV‑LF：5'‑AGT ACC GGT GAG GCT CCG TC‑3'；CMV‑LB：5'‑GGT GAC ATG AGA AAG TAC GCC GT‑3'。