[发明专利]一种产N-乙酰神经氨酸重组微生物的构建方法及应用在审
申请号: | 201510189018.5 | 申请日: | 2015-04-20 |
公开(公告)号: | CN104878035A | 公开(公告)日: | 2015-09-02 |
发明(设计)人: | 陈献忠;周俊波;杨海泉;沈微 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/61;C12N15/60;C12N1/21;C12P19/26 |
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地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种产N-乙酰神经氨酸重组微生物的构建方法及应用。通过密码子优化、基因克隆等分子生物学技术分别构建了表达N-乙酰葡萄糖胺-2-异构酶基因和N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因的两株重组大肠杆菌。两株重组微生物经诱导培养、按一定比例混合后,能够高效的生产N-乙酰神经氨酸。以N-乙酰葡萄糖胺和丙酮酸钠为底物,以两株重组微生物作为全细胞为催化剂,经催化反应后N-乙酰神经氨酸产量可达260mM(80.5g/L),最高底物转化率达43.3%。 | ||
搜索关键词: | 一种 乙酰 神经 氨酸 重组 微生物 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种重组微生物催化生产N‑乙酰神经氨酸的方法,其特征在于分别表达N‑乙酰葡萄糖胺‑2‑异构酶基因slr1975*和N‑乙酰神经氨酸醛缩酶基因nanA;所述N‑乙酰葡萄糖胺‑2‑异构酶基因来源于集胞藻(Synechocystis sp.)PCC 6803,核苷酸序列如GenBank登陆序列号:NC_000911.1所示;所述N‑乙酰神经氨酸醛缩酶基因来源于大肠杆菌K12(Escherichia coli),核苷酸序列如GenBank登陆序列号:NC_000913.3所示;所述的微生物宿主是E.coli BL21(DE3)。
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