[发明专利]用烤烟低次烟叶制备多糖和/或烟用香膏的方法

摘要

本发明公开了一种用烤烟低次烟叶制备多糖和/或烟用香膏的方法，将烤烟低次烟叶粉碎过40‑60目筛；称取样品，以120‑130的料液比，加入水；再以功率400～600w超声提取7～10min；以转速10000r/min于4℃温度下离心15min，取离心后上清液，于70℃减压蒸发，浓缩至体积的1/5；以及取浓缩液，加无水乙醇进行醇析，再离心，离心后上清液用于制香膏，下部沉淀用于精制多糖。本发明的一种用烤烟低次烟叶制备多糖和/或烟用香膏的方法，不仅可以避免烤烟低次烟叶处置时污染环境的问题，还能够提取出多种高附加值产品，从而最大限度地创造经济价值。

主权项

一种用烤烟低次烟叶制备多糖和烟用香膏的方法，其特征在于它包括以下步骤：步骤一、将烤烟低次烟叶粉碎过40‑60目筛；步骤二、称取样品与水混合，其中样品与水的质量比为1:20‑1:30，再通过功率400‑600W超声提取7‑10min；步骤三、以转速9000‑11000r/min于3‑5℃温度下离心13‑17min，取离心后上清液，于65‑75℃减压蒸发，浓缩至体积的1/6至1/4；步骤四、取浓缩液，加入体积为浓缩液3‑5倍的无水乙醇，在3‑5℃醇析43‑53h；再以转速9000‑11000r/min离心，离心后的上清液用于制香膏，将下部沉淀用于精制多糖；步骤五、将步骤四中的上清液用稀硫酸调节pH至2.5‑3.5，静置3.5‑4.5h后，以9000‑11000r/min转速离心，取上清液，于65‑75℃下减压蒸发浓缩至膏状，即制得烟用香膏；将得到的烟用香膏用同时蒸馏法萃取进行气质联用分析香味成分，量取流动状膏体10mL放入同时蒸馏萃取装置一端的1000mL平底烧瓶中，加入300mL蒸馏水，用电子调温电热套加热，装置的另一端蒸馏瓶中注入50mL二氯甲烷，于60℃水浴中加热，同时蒸馏萃取2.5h后，加入1mL内标乙酸苯乙酯，浓度为0.3765mg/mL，将二氯甲烷萃取液60℃浓缩至约1mL，低温密封保存，用于GC/MS分析，采用内标法对香味物质进行定量，假定相对校正因子为1，对各种香味物质按照下式进行定量计算，将步骤四中的下部沉淀用蒸馏水溶解，采用Sevage法脱蛋白，至两相间无明显的蛋白沉淀，然后利用丙酮脱色，3‑5℃醇析10‑14h，再次离心取沉淀，经真空冷冻干燥，得到烟叶粗多糖；步骤六、称取烟叶粗多糖以mg计35‑45份，用以mL计3‑5份的0.15‑0.25mol/L NaCl缓冲液溶解，经0.20‑0.24μm的水相滤膜过滤，依次经DEAE‑52纤维素柱和Sepharose CL‑6B层析柱分离，用0.15‑0.25mol/L的NaCl缓冲液以0.5‑0.7mL/min的流速洗脱，再根据多糖组分分类收集，冷冻干燥，即为精制多糖。