[发明专利]用烤烟低次烟叶制备多糖和/或烟用香膏的方法

说明书

技术领域

本发明涉及烟草废弃物再利用技术领域，具体涉及一种从烤烟低次烟叶中提取多糖和烟用香膏的方法。

背景技术

我国是烟草生产大国，无论是烟草植物的种植面积还是产量都居世界首位。我国每年烟叶产量达250万吨左右，其中大量低次烟叶、烟末等下脚料被废弃，不能用于烟叶生产，这些烟草废弃物主要来源于大田生产、初烤及烟叶复烤、卷烟加工过程，大体可分为烟草农业和工业两大方面。烟草农业废弃物包括大田顶叶、脚叶、烟花、烟杈、腋芽、低次烟叶、烟杆、烟根等，约占烟叶产量的15％左右。按照国家烟草专卖管理的要求，废弃烟草物质必须在严格监管下进行处置，而且大田废弃物如不及时处置，将带来田间的病虫害，对正常烟叶产生不良影响。烟草大田废弃物处置的传统方法基本以焚烧或填埋为主，需要投入大量人力、物力、财力，在对空气、土壤和地下水带来污染的同时也造成了极大的浪费。

对烟草废弃物再利用进行研究，不但可以减少对环境的污染，同时减少了对资源的浪费，符合可持续发展的要求，还可以最大限度地创造经济价值。正因为如此，从上世纪90年代开始，行业内外对此开展了大量研究工作。其中对于烟草大田废弃物的再利用研究包括制备有机肥、生物农药、活性炭、饲料、燃料、烟用薄片等，也包括从大田废弃物中提取一些高附加值产品如烟用香料、多糖、蛋白质、烟碱、茄尼醇、氨基酸、多酚等。

低次烟叶包括烟草大田打掉的顶叶、脚叶、发育不良及长宽达不到要求的烟叶等，一亩烟田产生的低次烟叶达90-130kg，通常这部分低次烟叶同其他废弃物一起填埋或焚烧处理，造成环境污染和资源浪费。许春平等研究了晒红烟低次烟叶多糖的提取及其生物活性的分析，结果表明，晒红烟低次烟叶提取的多糖具有较强的总抗氧化活性和较好的自由基清除活性。但其对提取多糖的废液并未充分利用，也没有针对烤烟低次烟叶多糖提取进行研究。

前述对烟草废弃物再利用的途径比较单一，缺乏综合利用研究。

发明内容

本发明克服了现有技术的不足，提供一种用烤烟低次烟叶制备多糖和/或烟用香膏的方法，用于解决烤烟低次烟叶处置时对环境造成污染的技术问题，并同时最大限度地创造经济价值。

考虑到现有技术的上述问题，根据本发明公开的一个方面，本发明采用以下技术方案：

一种用烤烟低次烟叶制备多糖和/或烟用香膏的方法，它包括以下步骤：

步骤一、将烤烟低次烟叶粉碎过40-60目筛；

步骤二、称取样品与水混合，其中样品与水的质量比为1:20-1:30，再通过功率400-600w超声提取7-10min；

步骤三、以转速9000-11000r/min于3-5℃温度下离心13-17min，取离心后上清液，于65-75℃减压蒸发，浓缩至体积的1/6至1/4；

步骤四、取浓缩液，加入体积为浓缩液3-5倍的无水乙醇，在3-5℃醇析43-53h；再以转速9000-11000r/min离心，离心后上清液用于制香膏，和/或下部沉淀用于精制多糖；

步骤五、将步骤四中的上清液用稀硫酸调节pH为2.5-3.5，静置3.5-4.5h后，以9000-11000r/min转速离心，取上清液，于65-75℃下减压蒸发浓缩至膏状，即制得烟叶香膏；

和/或将步骤四中的下部沉淀用蒸馏水溶解，采用Sevage法脱蛋白，至两相间无明显的蛋白沉淀，然后利用丙酮脱色，3-5℃醇析10-14h，再次离心取沉淀，经真空冷冻干燥，得到烟叶粗多糖；

步骤六、称取烟叶粗多糖以mg计35-45份，用以mL计3-5份的0.15-0.25mol/L NaCl缓冲液溶解，经0.20-0.24μm的水相滤膜过滤，依次经DEAE-DE52纤维素柱和Sepharose CL-6B层析柱分离，用0.15-0.25mol/L的NaCl缓冲液以0.5-0.7mL/min的流速洗脱，再根据多糖组分分类收集，冷冻干燥，即为精制多糖。

为了更好地实现本发明，进一步的技术方案是：

根据本发明的一个实施方案，所述步骤三中以转速10000r/min于4℃温度下离心15min，取离心后上清液，于70℃减压蒸发，浓缩至体积的1/5。

根据本发明的另一个实施方案，所述步骤四中取浓缩液，加入体积为浓缩液4倍的无水乙醇，在4℃醇析48h，再以转速10000r/min离心。

根据本发明的另一个实施方案，所述步骤五中：