[发明专利]16SrRNA甲基化酶rmtB的LAMP检测引物、检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种16S rRNA甲基化酶rmtB的LAMP检测引物、检测试剂盒及检测方法。本发明的检测引物由一对外引物F3、B3，一对内引物FIP、BIP和一个环引物L组成。检测试剂盒包括若干个装有反应液的LAMP反应管，反应液中含有2×等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、引物等。检测方法为首先提取待检细菌基因组的DNA，加入LAMP反应管的反应液内，63℃水浴恒温反应45‑60min，根据有无白色沉淀或者反应液加入钙黄绿素后是否变绿判定结果。本发明解决了现有PCR技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷；具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作简单，适于现场快速检测的优点。

主权项

一种16S rRNA甲基化酶rmtB的LAMP检测引物，其特征是，由一对外引物F3、B3，一对内引物FIP、BIP和一个环引物L组成，其核苷酸序列分别如下：外引物F3：5’‑CGATGCCCTCACCTCCAT‑3’；外引物B3：5’‑GCCTTTTTTACATCGCCCG‑3’；内引物FIP：5’‑ATTCCTCAGTCAGGATGCGCCGGCCTCAAAAAAATACCGCG‑3’；内引物BIP：5’‑CCAAACAGACCGTAGAGGCTGCCAGCCTTGAGCGATTCCG‑3’；环引物L：5’‑GCTGCATGGAATTTGCGGGG‑3’。